研究背景:骨肉瘤是最常见的骨原发性恶性肿瘤,年发病率约为0.2~0.3/10万。骨肉瘤好发于青少年,发病年龄多为5-20岁。好发部位为长骨,一般为股骨远端或胫骨近端,其次为肱骨近端,其他部位较少见。其血行转移发生早且发生率高,进展迅速,转移部位多位于肺部。1970年以前,对于无转移的肢体骨肉瘤一般采取截肢手术治疗,其五年生存率不足20%,患者死亡的主要原因是肺转移。化疗药物的应用使得骨肉瘤患者肺转移率得到明显控制,5年生存率达到60%-80%。但是仍有一部分患者对化疗药产生耐药而导致复发或转移,最终治疗失败而死亡。骨肉瘤的发生和发展是多因素参与、多步骤发展的生物学过程,深入理解骨肉瘤发生发展及转移机制对寻找理想的治疗靶点具有重要意义。p21活化激酶5(p21-activated kinase 5,PAK5)是PAKs家族中新近发现的成员,在细胞骨架重组,细胞生长、增殖、分化,基因转录及细胞凋亡等一系列的细胞功能中发挥重要作用。近年来研究发现,PAK5蛋白与某些恶性肿瘤的侵袭及转移密切相关,如乳腺癌、结肠癌等。但其在骨肉瘤中的研究鲜见报道。目的:探索PAK5在骨肉瘤侵袭转移及化疗耐药中的作用。方法:应用免疫组织化学方法检测PAK5在骨肉瘤及肺转移组织中的表达,并分析PAK5的表达与患者性别、年龄、发病部位、病理类型、Enneking外科分期、肿瘤坏死率、是否有肺转移、中位无进展生存期和总生存期等临床参数的相关性。应用QRT-PCR、western blot和免疫荧光染色检测骨肉瘤细胞中PAK5的表达情况。应用药物敏感实验、细胞增殖实验、划痕试验及Transwell侵袭小室试验分析PAK5在骨肉瘤细胞侵袭转移及药物耐药中的作用。结果:PAK5在骨肉瘤组织及肺转移组织中呈阳性表达,在骨正常组织中呈阴性表达。PAK5蛋白表达与化疗疗效、疾病预后以及骨肉瘤肺转移有明显相关性。化疗药物作用于沉默PAK5的MG63、Saos2细胞株后IC50降低并诱导细胞凋亡,且呈剂量依耐性。沉默PAK5的骨肉瘤细胞其增殖迁移转移能力明显弱于未沉默PAK5的骨肉瘤细胞。PAK5和MMP2在骨肉瘤肺转移组织中呈高表达。PAK5与肿瘤转移相关基因MMP2有相关性,呈正相关。结论:PAK5在骨肉瘤侵袭转移中发挥作用,并可能参与骨肉瘤化疗耐药的机制。