低分子量胶原多肽的制备及其抗氧化活性研究

来源 :山西大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:cyh_sh
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胶原多肽是由胶原蛋白或明胶酶解得到的多肽混合物,由于胶原多肽有着优良的营养特性和生理活性,因此在食品行业和化妆品行业有着广泛的应用前景。在化妆品中,多肽分子量是影响生物活性的最重要的因素,以往用胶原蛋白酶解制备胶原小分子多肽:酶解产物分子量分布较广、大分子胶原多肽含量较高,束缚了胶原多肽在化妆品中的应用。本论文采用多酶复合酶解法,对明胶进行酶解,极大的提高了酶解效率,解决了小分子胶原多肽得率低,酶解分子量分布不集中等问题。本论文以明胶为研究对象,采用三步复合酶解法制备分子量主要在1000 Da以下的小分子活性多肽。用单因素实验对胶原多肽水解工艺进行优化,并测定了明胶和水解胶原多肽的基本组成成分。研究其清除自由基的能力,并在此基础上进行动物实验,最终确定小分子胶原多肽的抗氧化特性。本文的研究内容体现在以下几方面:1.采用碱性蛋白酶→高温中性蛋白酶→酸性蛋白酶三步酶解明胶,在组合酶的最佳工艺条件下,总水解率可达35.16%。2.采用凝胶柱层析法对胶原多肽水解物的分子量分布进行测定,结果表明最优酶组合水解胶原多肽的分子量主要分布为1000 Da以下,占整个洗脱峰面积的74.4%,而且分子量为5000 Da以上的多肽只占5.22%。3.通过对胶原多肽水解物清除DPPH·自由基和羟基自由基(·OH)的试验表明,该多肽清除DPPH·自由基及羟基自由基的作用随浓度的增大而增强,呈量效关系。胶原多肽浓度为12 mg/mL时,DPPH·自由基清除率达78.71%;浓度为40 mg/mL时,·OH清除率达89.12%,半清除浓度HSC50为13.25 mg/mL。4.通过D-半乳糖致小鼠衰老模型,研究胶原多肽水解物对氧化损伤模型小鼠的抗氧化作用。结果表明,胶原多肽可显著降低氧化损伤模型小鼠血清中MDA含量、肝脏中LF含量;显著增加血清和肝脏中GSH-Px活力;显著提高小鼠脾指数和胸腺指数(P<0.05,P<0.01)。5.通过中波紫外线(UVB,280-320nm)和长波紫外线(UVA,320-400nm)诱发小鼠皮肤光老化模型,研究胶原多肽水解物对皮肤光老化小鼠的抗衰老作用。结果表明,胶原多肽可显著降低紫外线光致老化模型小鼠皮肤的MDA含量;显著增加HYP含量;显著降低紫外线光老化模型小鼠的皮肤重量(P<0.05,P<0.01)
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