肝细胞生成素(HPO)结构与功能的研究

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:changkou
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该论文选择人肝癌细胞系HepG2,人肺腺癌细胞GLC-82作为靶细胞,围绕HPO的结构与其受体结合功能、体外刺激增殖活性和FAD结合性的关系,以及HPO的分泌机制展开研究.首先构建、表达了HPO及其系列缺失体,建立了利用FACS分析HPO受体结合活性的体外检测方法.将HPO及其缺失体经FITC标记后,FACS分析结果以及体外刺激增殖结果表明,(1)参与组成HPO锥形结构N-末端无规卷曲的1~10位氨基酸残基对于HPO的受体结合活性具有一定的贡献,如果缺失这一段序列,会使其受体结合活性大大下降,相应的体外刺激增殖活性也随之降低.进一步的研究发现,这一段序列对于HPO的受体结合性并不是必需的,当HPO 1~20氨基酸残基缺失后,其受体结合活性会有所提高.(2)参与组成HPO锥形结构中α5螺旋的106~115位氨基酸残基对于HPO的受体结合活性是必需的,如果缺失这一段序列,会使其受体结合活性完全前失,其体外刺激增殖活性也大大下降.(3)参与组成HPO锥形结构C-末端环状结构的116~125位氨基酸残基对于HPO的受体结合活性具有一定的抑制作用,如果缺失这一段序列,其受体结合活性会显著提高.(4)HPO发挥体外刺激增殖活性与其相应的受体结合活性是密切相关的.如果HPO缺失体的受体结合活性下降,相应的体外刺激活性也随之降低.但相对于HPO△C10的研究发现,它虽然具有很高的受体结合活性,但其体外刺激活性与HPO相比,却下降了17.19﹪.这说明HPO发挥体外刺激增殖活性是通过HPO特异性受体来介导的,但HPO受体结合活性和体外刺激增殖活性并不完全一致.(5)HPO序列的C-末端对其体结合活性的贡献要比N-末端大,而且HPO发挥受体结合活性需要HPO锥形空间结构的完整性.
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