第一部分七氟醚预处理对TNF-α诱导离体大鼠肺微血管内皮细胞层通透性改变的影响　　 目的:1.观察不同浓度TNF-α和七氟醚处理对离体大鼠肺微血管内皮细胞层通透性的影响。　　 2.研究七氟醚预处理对TNF-α诱导离体大鼠肺微血管内皮细胞层通透性改变的影响,并探讨MitoKATP通道开放在此过程中所起的调节作用。　　 方法:　　 体外培养大鼠肺微血管内皮细胞层,分为对照组、TNF-α组(10ng/ml处理4小时)、七氟醚组(1.0MAC处理1小时)、5-HD组(0.5mmol/l处理0.5小时)、七氟醚预处理+TNF-α组(七氟醚1.0MAC处理1小时+TNF-α20ng/ml处理4小时)、5-HD+七氟醚预处理+TNF-α组(5-HD0.5mmol/l处理0.5小时+七氟醚1.0MAC处理1小时+TNF-α20ng/ml处理4小时),测定各组离体大鼠肺微血管内皮细胞层的通透性。　　 结果:　　 1.经TNF-α(1-50ng/ml)处理4小时可显著增加离体大鼠肺微血管内皮细胞层的通透性(p＜0.05)。在浓度为0-10ng/ml范围内,随着TNF-α处理浓度的增加,离体大鼠肺微血管内皮细胞层的通透性相应增加。　　 2.经七氟醚0.5MAC处理1小时后离体大鼠肺微血管内皮细胞层的通透性与对照组相比无统计学差异(p＞0.05)。经七氟醚(1.0-2.0MAC)处理1小时可显著增加离体大鼠肺微血管内皮细胞层的通透性(p＜0.05)。在浓度为0-2.0MAC范围内,随着七氟醚处理浓度的增加,离体大鼠肺微血管内皮细胞层的通透性相应增加。　　 3.在发现七氟醚可轻度增加细胞层的通透性后,进一步研究显示,与TNF-α组相比,七氟醚预处理+TNF-α组通透性明显降低(p＜0.05),同时,5-HD+七氟醚预处理+TNF-α组的通透性要高于七氟醚预处理+TNF-α组(p＜0.05)。　　 结论:　　 1.一定浓度的TNF-α可增加离体大鼠肺微血管内皮细胞层的通透性。　　 2.一定浓度的七氟醚可增加离体大鼠肺微血管内皮细胞层的通透性,并呈现剂量依赖关系。　　 3.七氟醚预处理可部分抑制TNF-α介导的离体大鼠肺微血管内皮细胞层通透性增加。此作用可被特异性线粒体ATP敏感性钾通道抑制剂5-HD抑制。　　 　　 第二部分七氟醚预处理对TNF-α诱导离体大鼠肺微血管内皮细胞p38MAPK活化的影响　　 目的:1.研究七氟醚预处理对TNF-α诱导离体大鼠肺微血管内皮细胞MAP激酶(p38MAPK)活化的调节作用。　　 2.观察阻断MitoKATP通道对上述调节作用的影响。　　 方法:体外培养大鼠肺微血管内皮细胞层,分为七氟醚组、5HD+七氟醚组、TNF-α15min组、七氟醚+TNF-α15min组、5HD+七氟醚+TNF-α15min组、TNF-α30min组、七氟醚+TNF-α30min组、5HD+七氟醚+TNF-α30min组,测定细胞质内p-p38的表达量。　　 结果:1.TNF-α15min组和TNF-α30min组细胞质内p-p38MAPK明显高于对照组。　　 2.七氟醚组和5HD+七氟醚组的组细胞质内p-p38MAPK明显高于对照组,而5HD+七氟醚组的p-p38小于七氟醚组。　　 3.七氟醚+TNF-α15min组和七氟醚+TNF-α30min组细胞质内的p-p38分别都明显低于相对的TNF-α15min组和TNF-α30min组。　　 4.5HD+七氟醚+TNF-α15min组和5HD+七氟醚+TNF-α30min组细胞质内的p-p38分别都明显高于相对的七氟醚+TNF-α15min组和七氟醚+TNF-α30min组。　　 结论:1.TNF-α可活化p38MAPK使细胞质内p-p38含量升高　　 2.七氟醚可通过活化p38MAPK使细胞质内p-p38含量升高,5-HD可通过关闭MitoKATP通道抑制七氟醚的这一作用。　　 3.七氟醚预处理可抑制TNF-α对p38MAPK的活化从而抑制TNF-α诱导离体大鼠肺微血管内皮细胞p-p38含量的升高。5-HD可通过关闭MitoKATP通道抑制七氟醚预处理的这一作用。