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骡为马和驴的杂交后代,大部分没有生殖能力,只有极少数母骡可育,但至今无公骡可育的报道。本实验以4头公骡的睾丸为实验材料,以公马和公驴睾丸作对照,通过细胞体外培养构建成纤维细胞系,并制备了染色体标本。此外,采用睾丸石蜡切片的HE染色及免疫荧光染色分析比较了不同个体公骡睾丸切面结构、曲细精管内细胞类型及精子发生情况的差异。本研究为公骡不育提供了细胞及组织水平的依据,为骡子的生殖调控机制提供了基础研究资料。研究结果显示:(1)4头公骡的染色体核型均为2n=63(XY),公马、公驴的核型分别为2n=64(XY).2n=62(XY)。(2)睾丸石蜡切片HE染色结果显示,4头公骡睾丸曲细精管间距宽、管腔大、腔内细胞少,而对照组公马、公驴睾丸内曲细精管分布较密集、间距小、管腔饱满、细胞数量多。(3)曲细精管内细胞的免疫荧光染色统计结果显示,公骡1、公骡2、公骡3、公骡4、公驴和公马睾丸切片单位生精小管内精原、精母细胞平均数分别为0.0、16.5、13.4、24.2、50.6、43.5;单位生精小管内进入联会期细胞平均数分别为0.0、2.7、0.6、16.3、17.5、12.5;4头公骡单位生精小管内的精子细胞平均数均为0.0,而公驴、公马的精子细胞平均数分别49.7和47.4;4头公骡的曲细精管内支持细胞分布均匀,这与公驴、公马的支持细胞分布情况基本相同。综上所述,与公马、公驴相比,公骡曲细精管间距宽、管腔大、腔内细胞少,曲细精管内精原、精母细胞以及进入联会期的细胞少,且无精子细胞。我们推测精子发生可能阻滞在减数分裂期。总之,精子发生阻滞的根源在于精原细胞不能进行正常的减数分裂。