Ⅰ型变态反应是一种IgE水平异常增高的疾病状态，涉及儿科、内科、耳鼻喉科和皮肤科等多个学科，严重者可以引起过敏性休克甚至死亡。世界上大约有1/4的人饱受I型变态反应困扰。近几年，随着生活环境和生活方式的改变，新的变应原不断出现，发病率日渐增多。过敏原的检测可以在早期识别敏感病人，决定后续预防与治疗措施。目前对过敏原的体外检测方法(FAST、ELISA)操作繁琐、费时，每次只能检测一种或者少数几种过敏原，而作为常规检测的过敏原有200余种，这给临床医生在选择检测项目和具体操作时带来困难。 目的：研制一种可同时检测18种过敏原特异性IgE的蛋白质芯片，并初步应用于临床检测，为将来给临床提供一种高效实用的过敏原特异性IgE检测技术与方法奠定基础。 方法：1.过敏原提取液原液的蛋白浓度测定与浓缩处理；2.以多聚赖氨酸处理玻片、甲醇处理PVDF膜片、PBS处理硝酸纤维素膜片和尼龙膜片为固相载体，制备不同基片的芯片，对海鱼特异性IgE阳性的同一标本进行检测，根据检测结果优选固相基片；3.分别以戊二醛、乙醇和丙酮作为化学药物交联剂，对过敏原点样后的固定条件进行优化；4.用L16(44×23)正交法对芯片制备及使用条件进行优化。Scanarray4000激光共聚扫描仪成像，Quantarray软件分析荧光强度；5.根据上述结果制备可同时检测18种过敏原的蛋白质芯片并对芯片的检测灵敏性、重复性和稳定性进行检测；6.本芯片和IVT试剂盒对138份标本进行对比检测，SPSS统计分析软件分析检测结果。 结果：选择硝酸纤维素膜为固相基片，制备条件与过程为：1)配制过敏原点样液；2)点样后37℃湿盒中固定2h；3)0.1％戊二醛室温下化学固定0.5h；4)洗膜；5)2％BSA37℃湿盒中封闭2h。 使用条件及步骤：1)1：8稀释待检血清后与芯片37℃湿盒中杂交2h；2)洗膜；3)加2.5μg/mL生物素37℃湿盒中孵育1h；4)1.25μg/mL亲和素37℃湿盒中孵育1h；5)洗膜、干燥后扫描。 芯片的检测灵敏性、重复性、稳定性好，血清稀释128倍仍可检测到特异性IgE的存在。与IVT试剂盒进行比较，两种方法对鸡蛋、海鱼、大豆、花生、大籽蒿花粉等大部分过敏原的检出率无差异(x2检验p＞0.05)，阳性检测符合率为60.19％。 结论：过敏原特异性IgE检测芯片，将目前对过敏原特异性IgE的单一检测(或少数几种的检测)变为多种同时检测，具有样本用量少、检测指标多、操作简便、价格低廉等优点。这是国内首次应用蛋白质芯片技术对多种过敏原进行检测。该方法具有较强的临床检测使用价值，是未来诊断试剂的发展方向。