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背景及目的:
高压电烧伤后创面的局部变化受多种因素影响,如电流强度、电压、组织电阻、电流的径路和接触电源时间长短等,这些因素导致损伤组织局部病理生理改变极为复杂。在深度烧伤和电损伤及各种创伤等临床治疗中,经常存在着组织损伤程度不一(正常组织、坏死组织和损伤组织共存)和组织坏死界限不清晰的困难问题,故在这种创面修复的过程中,难以一次性准确清除坏死组织,从而导致不能满意地愈合,尤其在电损伤后可能继续造成更大范围局部组织坏死,给临床治疗带来极大困难,由于电损伤后局部损伤机制非常复杂,国内自1984年以来,就对如何阻断损伤后坏死的组织代谢产物及其所产生的后果进行了较为系统的研究。朱志祥教授首创的局部组织透析技术在深度烧伤早期修复、电损伤的急诊修复和整形外科领域组织瓣移植中成熟应用,取得了很好的疗效。
然而目前局部组织透析促进创伤愈合具体机制尚未阐明,因此朱志祥等对此进行了系列研究,并中标于2005年广东省深圳市科技局重点计划项目:课题名称为:《超滑微型烧伤透析引流管及临床应用研究---朱志祥,张立勇等》,本实验是该课题的一部分,主要是对电损伤后局部骨骼肌肉组织的透析治疗进行深入研究,目的在于探求局部组织透析促进创伤愈合的机制,以更进一步了解创伤愈合的过程。本实验研究的成功,将建立局部组织透析的部分理论基础,以便更成功推广应用此项技术,特别是在整形外科、深度烧伤修复治疗和电损伤急诊修复等领域中,经各种组织瓣转移修复后的创伤修复应用,造福广大患者,带来积极社会效益。
方法:
选用普通级新西兰大白兔12只为实验动物,雌雄不拘,月龄4-5个月,体重2-2.5公斤,动物由南方医科大学南方医院实验动物中心购回后在医院实验动物饲养中心单个分笼饲养,自由摄取标准的兔饲料(与兔一并购回)及清洁水,室温20±2℃。随机等分为实验组A和对照组B,均按照国内朱志祥等所用方法制作成兔“非热”高压电损伤特重度的标准实验模型。在标准模型中,用两种不同的方法对电损伤局部骨骼肌肉组织进行处理(按朱志祥方法配制的局部组织透析液进行局部组织透析和单纯用0.9%生理盐水进行局部组织冲洗引流),每次处理完毕后将兔放回笼饲养。实验组 A (n=6):同标准实验模型一样把本实验各模型电损伤区分A、B、C、D、E五区,透析管自E区置入到电损伤部位肌肉组织深层内,从A区出,E端的透析管接自行配制的局部组织透析液(透析液主要组成为:5%葡萄糖、0.9%生理盐水、2%利多卡因、氯霉素等)进行局部组织透析,慢速灌注(3~5滴/分),4h、10h、20h、30h、45h在A端接负压引流瓶收集透析引流液;
对照组B (n=6):单纯用0.9%生理盐水处理,余操作均同A组在A端接负压引流瓶收集冲洗引流液。比较观察以下指标:1.不同处理方法对损伤局部组织微环境电解质K<+>、Na<+>、CL<->、Ca<2+>浓度的变化和局部组织间液渗透压的变化影响。2.不同处理方法对电损伤局部组织间液中IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α的影响变化。
结果:
(一) 损伤局部组织微环境电解质中K<+>、Na<+>、CL<->、Ca<2+>浓度变化和局部组织间液渗透压的变化处理期间内A组各离子浓度和渗透压浓度均较B组不同程度提前接近到常态平衡,采用重复测量设计方差分析表明A、B组间比较和组内各时间点的指标比较均有显著的统计学意义(P<0.019~0.179)。
(二) 电损伤局部组织间液中IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α的变化处理期间内各时问点实验组A组织间液中IL-1、IL-6、IL-8浓度从4h就开始一直较实验组B低,并成逐渐下降趋势,且实验组A下降的幅度明显比组B大;然而,从4h开始TFNF-α浓度实验组A却较对照组B高,也在逐渐下降。采用重复测量设计方差分析均表明组问比较和组内各时间点的指标比较均有显著的统计学意义(P<0.01~0.05)。
结论:
1.本研究成功地应用“非热”高压电损伤特重度模型进行局部组织透析实验研究,并创用了负压引流收集透析液的技术,探索出局部组织透析技术的部分机制。
2.发现了电损伤局部组织间液中存在大量的IL-1、IL-6、IL-8,TNF-α,发现了电损伤局部组织间液中电解质K+、Na+、CL-、Ca2+浓度和渗透压有意义的变化,证明了电损伤后包括细胞膜在内的膜结构损伤存在,导致局部电解质浓度和渗透压的紊乱,并引起局部组织细胞水肿、破裂乃至坏死的恶性循环。
3.本研究证明了电损伤后尽早清除明显坏死组织再予以持续局部组织透析,通过透析液的直接作用可以稳定局部微环境电解质K+、Na+、CL-、Ca2+的浓度和局部组织间液的渗透压,稳定包括细胞膜在内的膜性结构,从而减少局部组织因局部微环境电解质破坏而导致的恶性循环,维持组织细胞生长耐以生存的内环境的动态平衡。
4.本研究证明了电损伤后尽早清除明显坏死组织再予以持续局部组织透析,通过透析液的直接作用可以减少损伤局部组织问液中炎症介质IL-1、IL-6、IL-8浓度,增加损伤局部组织问液中TNF-α浓度,从而减少局部组织中炎症介质持续高含量存在导致的组织损伤和坏死恶性循环。
5.本研究证明了电损伤后尽早清除明显坏死组织再予以持续局部组织透析,一定程度能阻止电损伤局部组织细胞坏死进程,并能促进损伤组织细胞愈合,这也为我们进一步推广临床应用打下坚实的基础。