论文部分内容阅读
目的：本实验通过研究胰岛素样生长因子（IGFs）在早期胚胎发育终止绒毛及蜕膜组织中的表达以及母体血中IGF-I水平的改变，初步探讨IGFs与早期胚胎发育终止的关系。通过研究胰岛素对体外培养滋养细胞凋亡的影响，并通过检测其作用中与凋亡密切相关的半胱天冬酶-3活性和Bcl-2蛋白表达情况，探讨胰岛素对体外培养的滋养细胞凋亡的影响及可能的机制。 方法：本实验采用免疫酶联法检测正常妊娠及早期胚胎发育终止孕妇血中IGF-I水平的变化，采用免疫组化—过氧化物酶染色法，检测早期胚胎发育终止绒毛及蜕膜组织中IGFs蛋白的表达。采用原位杂交法，检测早期胚胎发育终止绒毛及蜕膜组织中IGFs mRNA的表达。体外培养早期妊娠滋养层细胞，实验分为正常对照组、过氧化氢（H2O2）组和胰岛素+H2O2组。以过氧化氢（H2O2）诱导滋养层细胞凋亡，并观察胰岛素 第四罩医大学硕士学位论文对HZOZ诱导滋养层细胞凋亡的影响，检测指标为透射镜观察滋养细胞凋亡的形态学特征，流式细胞术检测滋养细胞凋亡率：为探讨胰岛素影响滋养细胞凋亡的作用机制，以荧光分光光度法检测胰岛素对滋养细胞半恍天冬酶〕＊aspase上)的活性的影响，流式细胞术检测胰岛素对滋养细胞BC12蛋白表达的影响。结果：免疫组化结果显示，正常早期妊娠绒毛及蜕膜组织中IGFS的表达明显高于早期胚胎发育终止组（P＜0刀1）；原位杂交结果显示，干常早期妊娠绒毛及蜕膜组织中IGFs mRNA的表达明显高于早期胚胎发育终止组（P＜0刀1），正常早期妊娠母血中IG卜1水平高于早期胚胎发育终止组(尸＜0刀1人N0。可诱导体外培养的滋养细胞凋亡，透射电镜可见特征性的凋亡细胞核改变；胰岛素可显著抑制经HZOZ诱导滋养细胞的凋亡，流式细胞术检测其凋亡率较HZOZ组显著降低。HZOZ组滋养细胞caspaseS活性较对照组显著增高(P＜0刀1人Bcl习蛋白表达较对照组显著下降(P＜0刀1人胰岛素和H。O。组滋养细胞casppe上活性较单纯H。O。组显著降低（P＜0．of），而BCI－2蛋白表达增高（P＜0．of）。结论：母体血中IGF－I含量的减少可能是导致早期胚胎发育终止的重要原因之一。胰岛素可明显抑制HZOZ诱导的滋养细胞凋亡，其机制与降低c呷ase习活性和促进BclZ蛋白表达有关。研究发现IGFs对早期胚胎发育具有重要意义，补充胰岛素治疗则有望为凋亡的滋养细胞提供保护作用，从而维持胎盘和胎儿的正常生长，因此该研究有可能为补充胰岛素治疗某些妊娠相关疾病提供前期的实验基础和理论依据。