【摘 要】
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巯基物质(如半胱氨酸、高半胱氨酸、还原型谷胱甘肽等)是生物体内主要的抗氧化剂,并以多种形式广泛存在。它们的生物功能可受到多种酶(如谷胱甘肽转移酶)的影响。因此,定量检
【出 处】
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中国科学院研究生院 中国科学院大学
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巯基物质(如半胱氨酸、高半胱氨酸、还原型谷胱甘肽等)是生物体内主要的抗氧化剂,并以多种形式广泛存在。它们的生物功能可受到多种酶(如谷胱甘肽转移酶)的影响。因此,定量检测巯基物质及相关酶对疾病的诊断研究具有重要意义。目前,利用高选择性、高灵敏度的光学探针开展它们的检测研究已成为前沿课题之一。其中,荧光探针由于能够实现活体的原位、实时成像尤其受到关注。本论文借助有机染料以及半导体纳米发光材料——量子点优良的光学性能,结合实验室的研究课题,设计、合成了若干新型光学探针,并开展了它们在生物体系中的分析应用研究。主要工作包括以下三个方面:
1.基于巯基物质的芳环亲核取代作用,以BODIPY为母体,设计、合成了检测半胱氨酸的荧光探针。所制备的探针具有选择性好、灵敏度高等优点,与半胱氨酸反应可产生快速、明显的荧光增强,检测限可达30nM。据此建立了半胱氨酸的简便检测法,并成功用于人血清中游离半胱氨酸的测定。
2.基于类似的反应机理,还发展了检测谷胱甘肽的尼罗红类荧光探针。该探针发射波长接近650nm,可有效避免生物基质中短波长荧光的干扰,已用于细胞内谷胱甘肽浓度变化的荧光成像分析。
3.将吸电子特性的胎盘型谷胱甘肽转移酶底物(3,4-二硝基苯甲酰胺基团)引入到CdTe/ZnTe量子点,构建了具有低背景信号的荧光纳米探针,并据此发展了一种检测胎盘型谷胱甘肽转移酶的高选择性、高灵敏度的方法。该方法可用于正常细胞和肿瘤细胞内胎盘型谷胱甘肽转移酶的荧光成像分析。
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