【摘 要】
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由子囊菌Magnaporthe oryzae引起的稻瘟病是水稻生产最严重的病害之一。最经济有效的防治方法和策略是创制和利用水稻抗病品种,因此深入研究稻瘟病菌与水稻互作机制,具有重要
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由子囊菌Magnaporthe oryzae引起的稻瘟病是水稻生产最严重的病害之一。最经济有效的防治方法和策略是创制和利用水稻抗病品种,因此深入研究稻瘟病菌与水稻互作机制,具有重要的理论和应用价值。本实验室前期系统研究了SPL11/SPIN6介导的水稻免疫反应分子机理。SPL11是一个U-box型E3泛素连接酶,而SPIN6是一个RhoGAP,两者通过特异性互作,协同负调控水稻先天免疫和细胞死亡。为了进一步解析SPL11/SPIN6介导的信号转导途径,本研究以SPIN6为诱饵进行酵母双杂交,得到了SPIN6在水稻中的32个互作蛋白,命名为Rho-GAP Associated Proteins (RAP1～RAP32)。本研究以这些RAPs为实验对象,对其进行基因克隆、蛋白互作验证、转基因材料创制和突变体鉴定,重点对其中的RAP4/5 (OsHUB1/2)进行了分析和鉴定。OsHUB1/2是拟南芥HUB1/2同源蛋白,为RING型E3泛素连接酶。研究结果表明,OsHUB1/2与SPIN6存在特异性相互作用,并且二者在体内、体外可形成同源及异源二聚体。OsHub1/2转录在Spin6的RNAi株系中被明显抑制,而在Spin 6的过表达株系中,OsHub1/2的转录水平增强。病原菌侵染会抑制OsHub1/2表达,而JA、 SA, ET及ABA等激素处理能诱导OsHub1/2表达。以上结果表明OsHUB1/2可能通过形成异源四聚体与SPIN6相互作用,从而参与SPL11/SPIN6介导的水稻免疫反应和细胞死亡。
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