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本研究以探究绵羊卵巢卵泡期与黄体期的差异为研究设计出发点,设计了实验组湖羊卵泡期下丘脑、垂体、卵巢和对照组湖羊黄体期下丘脑、垂体、卵巢以及实验组湖羊下丘脑、垂体、卵巢和对照组脂尾羊下丘脑、垂体、卵巢这两组实验。对比组合如下:1.卵泡期湖羊下丘脑(HAF):黄体期湖羊下丘脑(HAL);2.卵泡期湖羊垂体(PAF):黄体期湖羊垂体(PAL);3.卵泡期湖羊卵巢(OAF):黄体期湖羊卵巢(OAL);4.卵泡期脂尾羊卵巢(OZF):黄体期脂尾羊卵巢(OZL);5.卵泡期湖羊卵巢(OAF):卵泡期脂尾羊卵巢(OZF);6.黄体期湖羊卵巢(OAL):黄体期脂尾羊卵巢(OZL)。结果显示,HAF文库获得Clean Reads共17145814条;HAL文库获得Clean Reads共16353892条;PAF文库获得Clean Reads共17700558条;PAL文库获得Clean Reads共12984127条;OAF文库获得Clean Reads共20855404条;OAL文库获得Clean Reads共23333226条;OZF文库获得Clean Reads共14669930条;OZL文库获得Clean Reads共22745168条。
经差异分析,HAF:HAL组鉴定到64个差异表达miRNA;OAF:OZF组鉴定到14个差异表达miRNA;OAF:OAL组鉴定到43个差异表达miRNA;OAL:OZL组鉴定到40个差异表达miRNA;OZF:OZL组鉴定到7个差异表达miRNA;PAF:PAL组鉴定到5个差异表达miRNA。
经过生物信息学分析,差异表达miRNA富集到AMPK、PI3K、Wnt、Steroid hormone biosynthesis、Salivary secretion、PI3K-Akt、p53signaling、Notch、Melanogenesis、MAPK、Hippo、GnRH、Cell cycle和cAMP等信号通路。此外,经过miRNA-mRNA-通路联合分析,鉴定oar-miR-150、oar-miR-21、oar-miR-10a、oar-miR-10b、oar-miR-133、oar-miR-26b、oar-miR-19b、oar-miR-218a、oar-miR-494等为绵羊繁殖相关候选miRNA。
综上所述,通过高通量测序,成功获得了不同繁殖状态/相同状态不同繁殖力绵羊性腺轴器官的miRNA信息,并通过生物信息学确定一批繁殖相关的miRNA,为进一步开展绵羊分子育种提供参考依据。
经差异分析,HAF:HAL组鉴定到64个差异表达miRNA;OAF:OZF组鉴定到14个差异表达miRNA;OAF:OAL组鉴定到43个差异表达miRNA;OAL:OZL组鉴定到40个差异表达miRNA;OZF:OZL组鉴定到7个差异表达miRNA;PAF:PAL组鉴定到5个差异表达miRNA。
经过生物信息学分析,差异表达miRNA富集到AMPK、PI3K、Wnt、Steroid hormone biosynthesis、Salivary secretion、PI3K-Akt、p53signaling、Notch、Melanogenesis、MAPK、Hippo、GnRH、Cell cycle和cAMP等信号通路。此外,经过miRNA-mRNA-通路联合分析,鉴定oar-miR-150、oar-miR-21、oar-miR-10a、oar-miR-10b、oar-miR-133、oar-miR-26b、oar-miR-19b、oar-miR-218a、oar-miR-494等为绵羊繁殖相关候选miRNA。
综上所述,通过高通量测序,成功获得了不同繁殖状态/相同状态不同繁殖力绵羊性腺轴器官的miRNA信息,并通过生物信息学确定一批繁殖相关的miRNA,为进一步开展绵羊分子育种提供参考依据。