骨髓间充质干细胞培养及复合去抗原牛松质骨修复大鼠骨缺损的实验研究

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目的:通过体外培养、纯化、扩增Wistar大鼠骨髓间充质干细胞及扩增后的间充质干细胞与去抗原牛松质骨复合,移植入大鼠桡骨临界缺损处,比较复合物移植与单纯去抗原牛松质骨移植治疗大鼠节段性骨缺损的效果,初步探讨骨缺损治疗的骨组织工程学方法,为组织工程种子细胞及细胞载体(支架)的选择以及临床骨缺损的治疗提供实验研究依据。方法:将幼龄Wistar大鼠骨髓间充质干细胞离体培养、纯化、传代、扩增后与去抗原牛松质骨载体经体外等同于细胞培养的条件下复合培养,经扫描电子显微镜证实复合物有细胞生长后,移植入同种异体Wistar大鼠一侧5mm长桡骨节段性骨缺损处,另一侧植入单纯载体作为实验对照,空白对照缺损处不植入任何物质。分别于术后2、4、8、14、18周通过X线放射学检查、组织学检查、生物力学检测等手段,比较实验组与实验对照组、空白组的骨缺损修复情况。<WP=5>实验结果:术后2、4、8、14、18周各时间点实验组与实验对照组、空白组经放射学检查评价新骨生成有显著性差异(P<0.01)。术后4、8、14、18周各时间点组织学检查新骨生成速度、生成量均有显著性差异(P<0.01)。实验组14周骨缺损基本修复,骨髓腔出现。18周经生物力学三点抗弯曲实验载荷、弯曲应力检测,实验组与实验对照组新骨生成有显著性差异(P<0.01)。空白对照组各时间点均无新骨形成,最后缺损由纤维组织充填。结论:大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)能够经体外培养、纯化、扩增至体内成骨的有效浓度,是骨组织工程中适宜的种子细胞。去抗原牛松质骨(BCB)与MSCs能够在体外复合培养,移植入异体大鼠体内后未发现明显免疫排斥反应,是可以选择的细胞载体。MSCs/BCB复合物植入比单纯BCB植入能够加速骨缺损处新骨的形成,修复效果明显优于实验对照组。
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