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乳腺癌作为最常见的恶性肿瘤之一,严重影响女性的身心健康。手术、放疗、化疗、内分泌疗法和分子靶向广泛用于乳腺癌的治疗。中药在治疗肿瘤方面具有独特的优势,其具有毒副作用相对较小、作用靶点多样、不易产生耐药性等多种特点,在治疗肿瘤方面愈来愈受到重视。因此,研发一种适于体外给药方式、低毒副作用、抗乳腺癌效果好,用药量少的中药制剂具有重要意义与价值。本研究首先通过资料收集、文献查阅,初步整理出白花蛇舌草、苦参、防风等七十余种在临床上可有效治疗乳腺癌的中药材,再通过测定各药材对人乳腺癌细胞MDAMB-231的杀伤作用,筛选出了覆盆子、瓜蒌、紫苏、白花蛇舌草、苦参、防风等多种强抗乳腺癌作用的中药材,结合中药配伍,确定了一种抗乳腺癌的中药复方并命名为MW1712。其次通过CCK-8细胞活力测定,发现该中药复方不仅对人乳腺癌细胞MDA-MB-231有极强的抑制杀伤作用,对人黑色素瘤细胞B16、人肺癌细胞A549、人肝癌细胞HepG2均有较强的抑制作用,抑制率分别为:70.197%、69.823%、69.072%、64.653%。随后以人乳腺癌细胞MDA-MB-231为研究对象,就MW1712中药复方,进行了平板克隆、软琼脂克隆形成和细胞划痕实验,发现该复方能显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖及迁移,这也为qRT-PCR实验结果所证实:MW1712处理过的人乳腺癌细胞MDAMB-231中的foxm1、mmp9、Vimentin以及vegf的表达分别下调了37.85%、97.27%、99.21%、87.41%。AO/EB荧光双染结果显示该中药复方显著促进人乳腺癌细胞MDAMB-231凋亡,qRT-PCR实验同样证实了这一点,被中药复方处理过的人乳腺癌细胞MDA-MB-231中的促凋亡相关基因p53表达显著上调(p<0.01)。qRT-PCR进一步发现,耐药基因mdr1显著下调(p<0.01),该中药复方还可能降低靶细胞的耐药性。最后通过DNA条形码技术,对复方中的多种药材进行了DNA水平的分子鉴定。对覆盆子、瓜蒌、紫苏三种关键药材进行基因组DNA提取,然后通过PCR扩增ITS2、psbAtrnH序列,并构建进化树,再将以上药材psbA-trnH序列在中药材DNA条形码鉴定系统进行鉴定,确定与之最为匹配的亲缘物种分别为茅莓、双边栝楼、紫苏。与ITS2结果结合,最终将待鉴定药材确定为:插田泡、双边栝楼、紫苏。综上所述,本工作研发了一种抗乳腺癌中药复方MW1712,初步确定了其抗MDAMB-231乳腺癌细胞的作用机制,并对其主要药材覆盆子、瓜蒌、紫苏进行了DNA条形码分子鉴定。本研究为抗乳腺癌中药复方的研发提供了重要的前期工作与基础。