定喘汤对哮喘小鼠气道炎症及Th2细胞的作用研究

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目的:从抗炎免疫出发,结合功能学、形态学、及分子生物学研究方法探讨定喘汤对哮喘小鼠气道炎症及气道高反应性的干预作用和对Th2细胞偏移的影响,初步观察定喘汤对哮喘小鼠Th2细胞的效应是否与GATA-3信号分子相关,从而进一步探讨定喘汤降低哮喘炎性病变的机制。为该方在哮喘的临床治疗提供科学依据。方法:40只雌性C57B1/6小鼠随机分为生理盐水对照组(10只),定喘汤对照组(10只),哮喘组(10只),定喘汤治疗组(10只)。卵蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发建立哮喘模型。末次激发24小时后,测定气道反应性。收集肺泡灌洗液(BALF)及行摘眼球取血,计数BALF及外周血中炎性细胞。HE染色及TNF-α免疫组化观察肺组织炎性病变。酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4,IL-5,IL-13,和TNF-α含量,同时行western blot检测肺组织中GATA-3蛋白表达的变化。结果:相较于哮喘组,定喘汤治疗组小鼠气道阻力显著降低;组织化学及免疫组化结果显示定喘汤治疗组小鼠肺组织炎性病变缓解,TNF-α表达降低;细胞计数结果显示BALF及外周血的炎性细胞比例在定喘汤治疗组小鼠显著下降;ELISA结果显示定喘汤治疗组小鼠BALF中的IL-4,IL-5,IL-13,和TNF-α含量均降低;Western blot结果显示定喘汤治疗组小鼠肺组织中GATA-3蛋白表达下降。结论:定喘汤处理可降低哮喘小鼠的Th2细胞相关因子的表达,减轻哮喘小鼠的气道炎性病变,降低TNF-α的表达,降低气道高反应性。GATA-3可能介导定喘汤抑制哮喘小鼠Th2细胞的作用。该结果进一步明确抑制Th2细胞在定喘汤降低哮喘炎性病变中起重要作用。
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