论文部分内容阅读
[目的]检测CML患者骨髓来源EPCs中BCR-ABL融合基因,探讨EPCs在CML病程中的重要作用。[方法]以CML患者骨髓中的EPCs为研究对象,采用密度梯度离心方法筛选CML患者骨髓中的EPCs;观察其形态,进行体外培养并绘制其生长曲线；采用免疫荧光双染色鉴定；采用实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)、荧光原位杂交技术(FISH)检测培养扩增的EPCs中BCR-ABL融合基因。同时进行EPCs中BCR-ABL融合基因与临床资料分析。[结果]1.CML患者骨髓来源EPCs分离、培养、鉴定培养第4天,内皮祖细胞出现早期集落,第6天集落数增加,7天后细胞融合达80%,至第14天细胞表现出典型的“鹅卵石”样,呈铺路石样排列。可与乙酰化低密度脂蛋白和荆豆凝集素相结合；CML患者骨髓来源EPCs细胞生长曲线近似“S”形。2. RQ-PCR方法检测CML患者骨髓来源EPCs中BCR-ABL融合基因：骨髓来源EPCs中BCR-ABL融合基因有2例为p210(+),治疗后NQ值较治疗前明显降低。3. FISH技术检测CML患者骨髓来源EPCs中BCR-ABL融合基因：CML患者骨髓来源EPCs中BCR-ABL融合基因均为阴性。4.骨髓肿瘤细胞与EPCs中BCR-ABL(p210)融合基因阳性率比较：21例CML患者骨髓肿瘤细胞与骨髓EPCs中BCR-ABL(p210)融合基因阳性率比较,差异具有统计学意义(p<0.05)。5.复杂核型染色体与普通染色体患者骨髓EPCs中BCR-ABL(p210)阳性率比较：2例复杂核型染色体与19例普通ph染色体患者骨髓EPCs中检测BCR-ABL(p210)融合基因阳性率比较,差异具有统计学意义(p<0.05)。6.低危组与中高危组患者骨髓EPCs中BCR-ABL(p210)阳性率比较：10例低危组与11例中高危组患者骨髓EPCs中检测BCR-ABL(p210)融合基因阳性率比较,差异无统计学意义(p>0.05)。7.CML患者骨髓EPCs中BCR-ABL(p210)融合基因与临床资料间比较：2例CML患者骨髓EPCs中BCR-ABL(p210)(+)与19例CML患者骨髓EPCs中BCR-ABL(p210) (-),各临床资料间比较,白细胞(t=2.986, p=0.008)、LDH (t=2.920, p=0.009)间,差异具有统计学意义(p<0.01),血小板(t=0.237,p=0.815)、HB (t=0.821, p=0.422)、β2-MG (t=0.362, p=0.721)间,差异无统计学意义(p>0.05)。[结论]CML患者骨髓能分离培养出内皮祖细胞；CML患者骨髓来源EPCs中可检测出BCR-ABL融合基因,通过观察,格列卫治疗后其NQ值治疗后较治疗前降低,提示EPCs在CML病程中有重要意义；在复杂核型染色体中均检测出BCR-ABL融合基因提示EPCs与CML患者病情与预后有关。