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众所周知，酶在有机合成中有着巨大的潜力，但是酶催化确没有被广泛采纳，主要存在四个主要问题：操作稳定性差，对非自然底物的选择性差，单位体积的生产效率低，成本高。本论文将酶的结晶技术与化学交联技术结合起来，制备出新型的交联酶晶体催化剂，能在较广的pH范围、较高的温度和有机溶剂中保持活性，在有机合成反应中有较高立体异构选择性。 粗Candida rugosa脂肪酶对手性羧酸的立体异构选择性较低，本研究采用有机溶剂50％2—丙醇处理脂肪酶，其酶活性与对手性羧酸立体异构选择性都有大幅度提高，脂肪酶的构象由‘闭式’向‘开式’转变。 Candida rugosa脂肪酶交联酶晶体制备过程包括两个主要步骤：酶的分批结晶和晶体的化学交联，这两步对于保证催化剂稳定性和良好的机械性能同等重要。用气相平衡法制备Candida rugosa脂肪酶晶体，沉淀剂以2-甲基-2，4戊二醇为最佳，优化结晶条件如下：沉淀剂2-甲基-2，4戊二醇浓度为40％、pH5.0—5.5、温度10℃。酶晶体采用双功能试剂戊二醛交联，优化交联反应条件如下：戊二醛浓度1％、pH5.0、温度25℃、时间60min。制备出的交联酶晶体不仅具有很好的温度稳定性和pH稳定性，而且在水溶性有机溶剂中如50％的四氢呋喃、50％-甲基亚砜等中仍能保持一定活性。 酶结构与功能的研究是我们必须面对的基本问题，对酶在晶体状态下的催化动力学的研究，交联Candida rugosa脂肪酶晶体的表观动力学常数KMapp。为7.30×10-2M，最大反应速度Vmax=7.9μmol／min.mg，其催化活性相对于溶液酶的有一定程度下降。对酶晶体催化剂界面活性研究发现交联酶晶体缺少界面活性。 Candida rugosa脂肪酶无论粗酶形式还是交联酶晶体形式都可以选择性催化（R，S）-酮基布洛芬氯乙酯水解，外消旋体底物中对映体（S）-酮基布洛芬氯乙酯的水解速度比（R）型对映体的水解速度快，所以产物酮基布洛芬的光学活性为（S）型对映体，只不过其交联酶晶体形式的立体异构选择性远大于粗酶。Candida rugosa脂肪酶交联酶晶体形式催化酮基布洛芬的氯乙酯的水