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胃癌是世界上第三大肿瘤致死性疾病,其发病率在全球确诊的癌症中排行第五。胃癌产生原因纷繁复杂。除了幽门螺旋杆菌H. pylori感染，很多其他因素都能提高患病几率。引起胃癌转移的因素包括信号通路的变化，原癌基因的调控等。已有证据表明Rho/ROCK信号通路、Erk/MAPK信号通路、PI3K-AKT-mTOR信号通路在胃癌转移过程中发挥重要作用。此外，转移相关基因 MTA1，接触蛋白Contactin1，LncRNA，基质金属蛋白酶MMP、细胞黏附分子与有胃癌转移也具有密切的联系。Podocalyxin类蛋白（PCLP1/PODXL）属于CD34家族唾液酸糖蛋白，它首次在肾小球足细胞中被发现。PODXL过表达已被报道与多种肿瘤的侵袭、浸润和不良预后相关，如乳腺癌，口腔鳞状细胞癌及结肠癌。但PODXL参与这些肿瘤细胞的侵袭和转移的作用机制还未明确。在胃癌发生发展中的作用还不清楚，因此，在本研究中，我们试图探索PODXL在胃癌细胞转移中的作用，并探索其作用机制。 本研究收集了74例胃癌病人的癌旁和癌症组织，接着提取组织蛋白和总RNA。Western-Blot和免疫组化结果表明，与正常组织相比胃癌组织中PODXL的蛋白水平显著提升。Real-time PCR结果显示胃癌组织中PODXL mRNA表达水平和癌旁组织中相比亦显著升高。为进一步研究PODXL在胃癌细胞中的功能，首先，我们扩增了PODXL的全长序列接着用过表达PODXL病毒和干扰PODXL慢病毒感染SGC-7901胃癌细胞株，建立稳定过表达和敲低PODXL表达的胃癌细胞株。利用CCK8实验检测PODXL对SGC-7901增殖影响，发现过表达PODXL后显著促进了SGC-7901细胞增殖。相反，下调PODXL的表达后抑制了SGC-7901细胞的增殖。利用7-AAD和BrdU染色分析PODXL对胃癌细胞周期影响发现：过表达PODXL后G0/G1期细胞比例减少而S期细胞比例增多，这提示PODXL促进了胃癌细胞从G0/G1向S期转化。利用划痕实验检测细胞的迁移能力发现：上调PODXL表达后显著促进了SGC-7901的迁移，而下调PODXL后SGC-7901的迁移能力减弱。利用Annexin V染色检测PODXL对SGC-7901细胞凋亡的影响发现：过表达 PODXL后促进 SGC-7901的凋亡。过表达 PODXL还促进了胃癌细胞SGC-7901从静止期向分裂期转化。我们通过体内皮下接种过表达和下调 PODXL表达的细胞株SGC-7901观察PODXL对成瘤影响，接着发现过表达PODXL促进了SGC-7901的成瘤，而下调PODXL后SGC-7901在体内生长缓慢。为了进一步探讨PODXL通过何种信号通路影响了SGC-7901的以上生物学行为，我们首先通过免疫沉淀实验用PODXL抗体和其同型抗体沉淀SGC-7901的细胞裂解液，将沉淀出的蛋白进行蛋白电泳和银染，切割PODXL抗体与同型抗体显著差异的条带，然后通过质谱鉴定这些条带中可能的蛋白。结合质谱结果和文献阅读，我们初步判断与细胞骨架重排相关的蛋白 RUFY1可能是 PODXL的结合蛋白。Co-IP和Western-Blot实验进一步证明PODXL和RUFY1相互作用。为更深入探讨PODXL和RUFY1相互作用影响了何种信号通路，我们利用Western-Blot检测AKT、NFkB、P38MAPK、ERK、PI3K等总量及磷酸化水平，结果显示过表达PODXL后AKT，MAPK/Erk磷酸化水平升高。提示PODXL和RUFY1相互作用通过AKT途径促进胃癌细胞的增殖和迁移。我们拟进一步研究PODXL是否通过和RUFY1相互作用而影响胃癌细胞的骨架重排而影响其迁移。由以上结果我们可以初步得出以下结论：PODXL在胃癌细胞的增殖、迁移、凋亡中发挥重要作用，PODXL在胃癌细胞中可能和RUFY1相互作用，并通过AKT途径影响胃癌细胞的增殖，迁移等生物学功能。本研究提示PODXL可以作为胃癌转移的新指标，为胃癌的诊断和治疗提供新的思路。