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本课题以广西特色的熟六堡茶为原料,先提取分离后做小鼠实验研究,再分离纯化并测定活性成分,从而为六堡茶的深加工和产业化发展提供理论数据和技术支持,同时促进六堡茶功能性产品的开发。(1)以广西熟六堡茶为原料,先用70%的乙醇提取浸膏,再用溶剂系统分离法,即选用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水分步萃取六堡茶浸膏,共可得到5个不同剂相的提取物并用于后续研究。其中,乙醇浸提物的提取率为18.08%,石油醚萃取物0.21%,乙酸乙酯萃取物0.64%,正丁醇萃取物1.63%,水相萃取物14.51%。结果表明,该提取方法简易可行,提取的物质中等极性以上的较多。(2)建立小鼠的急性高脂血模型,造模同时连续灌胃六堡茶提取物,14天后高脂模型组与空白对照组比较,血脂水平明显升高,造模成功;分别设定0.3和0.15(g-kg-1·bw-1·d-1)为大小剂量,与高脂模型组比较,筛选出对小鼠起降血脂作用的六堡茶提取物。其中0.3和0.15的水相萃取物,0.3的乙醇浸提物以及0.3的乙酸乙酯萃取物均能明显降低血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量,增加高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;而正丁醇和石油醚萃取物对TC、TG降低不显著,对HDL-C无明显影响。结果表明,六堡茶乙醇浸提物、乙酸乙酯萃取物和水相萃取物具有降血脂效果,且效果增强。(3)给小鼠灌胃3种六堡茶降血脂活性提取物10天。分别设定0.4和0.2(g-kg-1·bw-1·d-1)为大小剂量,与两个对照组比较,确定六堡茶的三大降血脂活性提取物对小鼠的抗凝血作用。其中0.4和0.2的乙酸乙酯萃取物,0.4和0.2的水相萃取物以及0.4的乙醇浸提物均能明显延长血浆活化部分凝血活酶时间(APTT);0.4和0.2的乙醇浸提物,0.4和0.2的乙酸乙酯萃取物以及0.4的水相萃取物均能明显延长血浆凝血酶时间(TT);0.4和0.2的乙酸乙酯萃取物,0.4的乙醇浸提物以及0.4的水相萃取物均能明显延长血浆凝血酶原时间(PT)。结果表明,六堡茶的3大降血脂活性提取物同样具有抗凝血效果,且效果增强。(4)以六堡茶乙酸乙酯萃取物为对象,经层析色谱(TLC)分离纯化后,共得到了5个极性段的物质;使用HPLC分析柱和通用程序进行梯度洗脱后,发现2’茶样的色谱分离情况最好;换用半制备柱并将2’茶样的洗脱程序进一步优化,确定最适的色谱条件并制备纯度较高的峰物质。结果分离得到四个纯度较高的峰;利用1H NMR谱和13C NMR分析这4个峰物质,结果分别判定为咖啡碱、没食子酸、紫槲皮甙和槲皮素。结果表明,六堡茶乙酸乙酯萃取物中存在的这些物质可能具有重要的降血脂功能性。