瘦素在原发性翼状胬肉发病机制中作用的研究

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mylocoy
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目的研究原发性翼状胬肉和正常球结膜组织中的Lp和LpR的表达及差异。方法采用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(StreptAvidin-BiotinComplex, SABC)法检测23例原发性翼状胬肉组织以及7例正常结膜组织中Lp和LpR的表达。结果正常结膜组织上皮基底细胞和基质层成纤维细胞Lp中呈弱阳性表达,原发性翼状胬肉组织的上皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞中Lp呈阳性表达,差异具有统计学意义(上皮层:P=0.000;基质层:P=0.026)。正常结膜组织的上皮层、基质层以及原发性翼状胬肉组织的上皮层、基质层和血管内皮细胞中LpR蛋白均为阳性表达,差异无统计学意义(上皮层:P=0.331;基质层:P=0.675)。结论在原发性翼状胬肉中Lp及其特异性受体可能在其发生发展过程中起到一定的作用。目的探讨原发性翼状胬肉组织中Lp, VEGF的表达,以及它们与CD105抗体所标记的微血管密度的相关性及临床意义。方法应用免疫组织化学SABC法,检测Lp、VEGF和CD105在23例原发性翼状胬肉组织和7例正常球结膜组织中的表达,计数CD105标记的MVD,并采用SPSS11.0统计软件进行相关性分析。结果原发性翼状胬肉较正常结膜组织高表达Lp和VEGF。原发性翼状胬肉组织平均MVD为19.22±6.68,正常结膜组织平均MVD 4.00±2.15,两者差异具有统计学意义(P=0.000)。原发性翼状胬肉组织中CD105-MVD与Lp的表达水平成正相关(上皮层:P=0.002;基质层:P=0.022),与基质层VEGF的表达成正相关(P=0.041),但与上皮层VEGF的表达无相关性(P=0.199)。结论Lp和VEGF在原发性翼状胬肉组织新生血管机制中起到一定的作用。目的:观察重组人瘦素(recombinant human leptin, rhLp)对体外培养HPFs增殖活性的影响并初步探讨其可能的机制。方法:将HPFs行体外原代和传代培养;在培养液中加入不同浓度的rhLp后,CCK8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期情况,Western blot法观察增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)蛋白的表达。结果:CCK8检测细胞增殖提示rhLp可促进HPFs的增殖,有一定的时间和计量依赖性;流式细胞仪检测显示rhLp能降低G0/G1期细胞比例并提高S期细胞比例,Western blot法检测显示rhLp促进PCNA蛋白表达增加具有计量依赖性。结论:本研究结果显示,rhLp可促进HPFs增殖,因此Lp在翼状胬肉的发病机制中可能起到一定的作用目的:观察rhLp对HPFs体外侵袭性生长的影响,并探讨其可能的机制。方法:将HPFs行体外原代和传代培养;在培养液中加入不同浓度(0,10,100,1000ng/ml)的rhLp作用12小时后,用realtime-PCR检测HPFs中MMP2和MMP9 mRNA的表达,Western blot法检测MMP2和MMP9蛋白的表达,用Transwell小室检测HPFs的侵袭能力。结果:realtime-PCR检测到仅100ng/ml rhLp作用HPFs 12h后MMP2.MMP9 mRNA的表达量与对照组有差异,具有统计学意义(P<0.05);Western blot法检测到不同浓度rhLp作用12h后MMP2、MMP9蛋白的表达量较对照组有差异,有统计学意义(P<0.05)。100ng/ml rhLp分别与10, 1000ng/ml rhLp实验组之间比较,差异具有统计学意义(P<0.05);1000ng/ml rhLp与10ng/ml rhLp实验组之间比较差异无统计学意义。100ng/ml rhLp处理20h后HPFs侵袭能力较对照组增强(P=0.000)。结论:rhLP在一定程度上可以提高HPFs的侵袭性生长能力,其作用机制可能与MMPs表达水平增高有关。
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