核桃组培快繁技术的研究

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本试验选用核桃实生苗和核桃20 年生树为试材,主要对核桃组培快繁技术各个环节进行系统化研究,并且针对每一环节中的关键措施进行探讨。试验中发现取材于20 年生核桃树的外植体茎段和叶片污染、褐变现象严重,苗分化数以及愈伤组织分化数达不到统计样本要求。故试验结果均是以核桃实生苗茎段和叶片为外植体材料得到的。诱导和增殖培养基均为改良DKW。试验结果显示:核桃茎段腋芽萌发的最佳激素组合为:BA0.5mg/L+KT0.5mg/L+IBA0.02mg/L;诱导核桃叶片形成愈伤组织的最佳激素配比为:6-BA0.01mg/L+2,4-D0.01mg/L;核桃无菌芽苗增殖的最佳激素配比为:BA0.005mg/L+IBA0.001mg/L;促使核桃愈伤组织增殖的最佳激素配比为:BA0.01mg/L+2,4-D0.8mg/L;诱导核桃愈伤组织芽分化的最佳激素配比为KT0.8 mg/L +NAA0.4mg/L;诱导生根的基本培养基为1/2DKW+蔗糖15g/L+琼脂7g/L,NAA浓度在10.0mg/L 时,生根率最高;蛭石基质中核桃无菌苗移栽成活率较高。试验对核桃茎段不同节位的芽体在萌发能力和叶片、茎段等诱导愈伤组织发生表现以及对愈伤组织诱导时是否需要光照等进行了研究。结果表明取材时选择核桃顶芽和顶芽下4~5 节段的芽体作为接种材料较为适宜。而核桃叶片是诱导愈伤组织形成的较佳材料,培养时需要在光照下进行。试验还对青霉素防止核桃茎段污染的效果进行了研究。结果表明用80μg/ml 青霉素和3g 多菌灵浸泡处理核桃外植体,控制污染效果显著。试验中利用单一因子PVP 作为抗氧化剂防止核桃外植体褐变进行了研究,结果表明用250mg/L 的PVP 预处理核桃外植体和用100mg/L 的PVP 作为培养基附加成分,褐变都可以得到有效控制。并通过三元二次回归组合设计得出Na2S2O3、AgNO3、PVP 三因子在抑制核桃外植体PPO 活性方面,以PVP作用最为突出,其次为Na2S2O3,再次为AgNO3
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