【摘 要】
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目的:建立小鼠实验性牙周炎模型,并在体外诱导骨髓间充质干细胞(BMMSCs)分化为破骨细胞,探讨主穹隆蛋白(major vault protein,MVP)在牙周炎骨吸收中的调控机制。方法:本课题采用MVP基因敲除型(MVP-/-)和野生型(WT)小鼠进行动物实验。于小鼠上颌牙槽骨局部注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)以建立牙周炎模型,利用Micro-CT扫描仪和配套软件对
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目的:建立小鼠实验性牙周炎模型,并在体外诱导骨髓间充质干细胞（BMMSCs）分化为破骨细胞,探讨主穹隆蛋白（major vault protein,MVP）在牙周炎骨吸收中的调控机制。方法:本课题采用MVP基因敲除型(MVP-/-)和野生型（WT）小鼠进行动物实验。于小鼠上颌牙槽骨局部注射脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）以建立牙周炎模型,利用Micro-CT扫描仪和配套软件对其进行三维重建和骨表型分析。采用免疫组化染色法验证MVP在小鼠体内的敲除效率;抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP）染色检测牙槽骨中的破骨细胞。同时,体外分离培养小鼠的BMMSCs,并诱导其向破骨细胞分化,蛋白质印记（Western Blotting）实验检测诱导第0、5、7天时MVP的蛋白表达变化;在诱导第5天时进行TRAP活性染色检测破骨细胞的数目、形态、大小;将破骨细胞接种于光滑的牛骨片上,之后采用麦胚凝集素（wheat-germ agglutinin,WGA）染色法进一步检测破骨细胞的骨吸收功能。采用Graph Pad Prism 6.0软件分析实验结果。结果:LPS诱导的小鼠实验性牙周炎中,敲除MVP促进牙周炎进展,表现为骨吸收加重,且在注射区域内破骨细胞数目增多;体外实验证明MVP在破骨分化过程中高表达,在分化的第5天达到表达峰值;敲除MVP后,BMMSCs诱导为破骨细胞的数量增多、体积变大,并且显示骨吸收功能增强。结论:MVP通过抑制破骨细胞分化从而减少骨吸收,在牙周炎中起骨保护作用。本文探讨了MVP在牙周炎的发生、发展中的作用及可能的机制,为临床治疗牙周炎提供理论依据,也为正畸矫治伴有牙周疾病的错牙合畸形提供更多可能性。
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