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目的：本文研究新型鬼臼毒素衍生物LGN抑制人肺腺癌细胞株A549作用，并初步探讨其作用机制。方法：1利用体外抗肿瘤筛选的方法MTT法和SRB法检测LGN的体外抗肿瘤活性。MTT法测定LGN和阳性对照药依托泊苷(VP-16)体外对各肿瘤细胞（A549、SKVO3、LOVO、H ela、HepG-2、K562）及正常细胞(VEC、MC-3T3)的IC50值或GI50值。2利用Giemsa染色法在光学显微镜下观察LGN作用后A549细胞株细胞形态学的变化和利用Hoechst染色法在荧光显微镜下观察LGN作用后A549细胞株细胞核形态的变化。3利用DNAladder法分析LGN作用A549细胞后，细胞染色体是否出现规律的断裂情况(细胞凋亡特征)。4利用流式细胞术定量分析不同浓度LGN对A549细胞周期及其凋亡率的影响。5利用RT-PCR检测LGN在不同浓度（0.1μmol/L、0.5μmol/L、1μmol/L）对A549细胞p53、bcl-2、bax、p21、topoⅡα、PCNA、caspase-3mRNA表达的影响。6利用Western-blot检测LGN在不同浓度（0.1μmol/L、0.5μmol/L、1μmol/L）对A549细胞PCNA蛋白的表达。7LGN体内抗肿瘤作用通过昆明小鼠荷瘤模型检测。结果：1LGN体外抑制多种肿瘤细胞增殖利用常用的简便体外抗肿瘤筛选法：MTT和SRB法检测了LGN的体外抑制肿瘤增殖的作用，结果表明LGN对多种肿瘤细胞均有较好的抑制作用，IC50值为0.22～0.77μmol/L；对A549抑制作用尤其显著IC50值为0.22±0.11μmol/L，比阳性对照药依托泊苷（VP-16IC50值为4.99±0.45μmol/L）在体外显示了更强的抑制肿瘤增殖的效果大约高22倍。实验显示LGN对人的正常血管内皮细胞（VEC）和成骨细胞（MC-3T3）具有较低的毒性IC50值分别为28.41±1.49，21.63±1.11μmol/L，提示其对肿瘤细胞有较好的选择性。进一步通过SRB法测得LGN对多种肿瘤细胞的GI50为0.43～1.72μmol/L，与MTT结果一致。接着又通过生长曲线法观察不同浓度LGN对A549细胞作用7天后对其生长状态产生的影响，结果显示3μmol/L LGN在第二天就可以完全抑制肿瘤细胞的增殖，并呈剂量依赖性，同等浓度LGN对肿瘤细胞生长抑制效应强于阳性对照的VP-16。2LGN诱导肿瘤细胞凋亡2.1形态学观察：Giemsa染色和Hoechst33342荧光染色结果均显示LGN作用于A549细胞后，细胞出现染色体固缩、凝集，凋亡小体的产生，核膜的皱缩等凋亡的特征性改变。2.2生化学观察：DNA琼脂糖凝胶电泳显示LGN作用于A549细胞后出现典型“DNALadder”梯子图。2.3流式细胞仪检测：流式细胞仪检测显示A549凋亡细胞的比例与LGN浓度间具有良好的量效关系。以上结果均可以说明LGN能够诱导A549细胞发生凋亡。3LGN对A549细胞周期的影响流式细胞仪检测细胞周期分布显示LGN对A549各生长时相都有抑制效应，G1期细胞的比例下降，S期细胞的比例先略升高后降低，G2+M期细胞的比例增加明显，且呈明显的剂量依赖性，表明LGN可以将细胞阻滞在G2+M期。4LGN对A549凋亡相关基因mRNA和topoⅡα基因mRNA的测定RT-PCR结果显示不同浓度的LGN（0.5、4、8μmol/L）作用于A549细胞24h后，成剂量依赖性地上调了p21、bax、p53、caspase-3、topoⅡα的mRNA表达，同时降低bcl-2和PCNAmRNA的表达，同溶剂对照组相比有显著性的差异（P＜0.05）。5LGN对A549PCNA蛋白表达的测定Western-blot结果显示不同浓度的LGN（0.5、4、8μmol/L）作用于A549细胞24h后，成剂量依赖性的下调PCNA蛋白表达，与溶剂对照组相比有显著性的差异（P<0.05）。6LGN体内抗肿瘤机制研究利用荷瘤鼠模型测定了不同浓度的LGN体内抗肿瘤活性：结果显示LGN体内有很好的抑瘤作用，20mg/kg weight组的抑瘤率达到了65.23%，且没有明显的系统毒性。结论：上述研究结果说明LGN体外能够抑制多种人源性肿瘤细胞的生长，尤其对肺腺癌细胞A549最为敏感，并且可以诱导A549发生显著的凋亡，并且将细胞阻滞在G2+M期。凋亡相关基因的表达调节是其诱导癌细胞凋亡的可能机制。