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表面增强拉曼散射光谱技术(SERS)具有超高灵敏度、高选择性和非侵入性等优点,在生命科学、食品安全,环境检测等领域极具发展潜力。鉴于银溶胶基底具有易于制备,成本低,SERS效应显著等优点,在学术研究领域中广泛使用银溶胶基底。通常,检测过程中,银溶胶基底与被测样品混合使用。样品组成与混合过程等变化对形成的热点分布具有显著影响。在重复采集其SERS光谱过程中,热点分布难以重现,导致其SERS分析结果重现性差;有些物质在拉曼激光照射下,也伴随着荧光光谱的产生,且荧光随激光照射时间呈显著降低趋势,也对SERS光谱精度造成较大干扰。因此,尽管SERS学术研究非常活跃,但在实际应用还存在很多困难,最严重的就是精度差。为此,本文旨在进行改善银胶基底SERS分析精度的方法研究,主要研究内容如下:(1)以水热还原法,使用柠檬酸钠和硝酸银,制备了银溶胶基底,用于改善SERS分析精度的研究。以碱性罗丹明B分子作为SERS探针,研究了样品加入顺序、促凝剂加入量、与样品混合溶液的pH、混合时间、罗丹明B浓度等对SERS效应的影响规律。研究结果表明,1M促凝剂体积5μL,1M柠檬酸5μL,加入顺序为银胶-罗丹明B-促凝剂,混合时间为1min,其SERS效应最佳;以1ppm罗丹明B为探针分子和在上述测试条件下,不同批次制得的银胶的SERS光谱的线性相关系数R2=0.98204。(2)以碱性罗丹明B分子作为SERS探针,激光照射伴随产生的荧光信号随时间及浓度等变化,使SERS谱图基线产生严重漂移,对SERS分析精度带来明显不利影响。常用的拉曼光谱基线校正方法,纯粹基于数学方法,参数选择不合适会造成的基线强制拉平,使信号失真。基于拉曼荧光效应变化机制,本文提出一种对SERS光谱随时间变化的差谱矩阵,进行主成分分析(PCA),提取出SERS光谱中的荧光光谱成分,建立了一种SERS光谱的新型基线校正方法,避免了数学方法的失真问题,提高了 SERS分析精度。(3)本文分析了银溶胶与样品混合对形成热点分布影响,得出了银胶基底在测试过程中形成的热点分布在微观上重现性较差是客观的,而拉曼光谱常用的激光光斑尺寸为微米级,其统计性不够的结论。为此,基于统计原理,提出了一种使用大光斑(最大光斑直径7mm)激光拉曼光谱仪改进SERS分析精度的方法。研究结果表明,增大光斑直径可明显改善SERS分析精度。累积随连续采集的光谱得到积分光谱,具有抑制高频噪声作用,使用积分光谱有利于改善SERS分析精度。综合使用最佳测试条件,大光斑SERS和新型拉曼光谱基线处理方法,可显著地改善银胶基底SERS分析精度,且提高1倍左右。