刺激隐核虫（Cryptocaryon Irritans）是严重危害东南亚海水养殖鱼类的寄生虫病原。MAPK与MHC Ⅱ抗原提呈通路是宿主免疫激活及特异性免疫起始的重要通路,在该寄生虫介导的鱼类相关通路应答机制还不清晰。本论文以石斑鱼为研究对象,对刺激隐核虫感染石斑鱼后的MAPK经典通路中的重要分子MEK及C-Raf,以及其通路与MHC Ⅱ信号通路相关性进行了研究。MEK双特异性蛋白激酶是一类丝裂原激活的蛋白激酶激酶,它通过将细胞外信号传递到细胞核而发挥整合点的作用。为了研究MEK在硬骨鱼中的作用,本论文克隆了石斑鱼MEK1和MEK2的c DNA序列,Ec MEK1和Ec MEK2具有80%的氨基酸一致性。Ec MEK1与其它硬骨鱼及哺乳动物MEK有89-99%的氨基酸一致性,而Ec MEK2有85-97%的氨基酸一致性。石斑鱼MEK1/2基因的外显子结构与斑马鱼和人MEK1/2基因相一致。组织分布分析显示,Ec MEK1和Ec MEK2在石斑鱼组织中的表达模式相似,主要在系统免疫器官中表达。细胞定位研究发现Ec MEK1和Ec MEK2均分布于转染GS（石斑鱼脾脏细胞）或HEK293T细胞的胞浆中。Ec MEK1或Ec MEK2能激活活化蛋白1（AP1）。经PMA处理后,头肾白细胞Ec MEK1/2和Ec ERK1/2的磷酸化水平显著升高。石斑鱼MEK1/2-ERK1/2通路在刺激性隐核虫感染中被激活,免疫后磷酸化增强,说明该通路在抗寄生虫感染中发挥作用。C-Raf原癌基因丝氨酸/苏氨酸激酶（Serine/Threonine kinase）是一种MAPK（Mitogen activated protein kinase）激酶,通过磷酸化MEK启动MAPK级联反应,进而激活ERK1/2（Extracellular signal regulated kinase）。为了研究C-Raf在硬骨鱼中的作用,克隆得到了石斑鱼C-Raf基因的c DNA序列。Ecc-Raf与其他脊椎动物C-Raf分子有81%-99%的氨基酸一致性,与尖吻鲈C-Raf的氨基酸一致性最高（99%）。基因组结构分析表明石斑鱼C-Raf与其它脊椎动物具有保守的外显子结构。组织分布显示Ecc-Raf主要在系统免疫器官中表达。细胞定位研究发现Ecc-Raf分布于转染GS细胞的胞浆中,Ecc-Raf的过表达仅轻微增强AP1的活性。与DMSO或未经处理的头肾白细胞相比,PMA和H2O2处理可诱导Ecc-Raf的磷酸化水平。C-Raf的总水平和磷酸化水平在刺激隐核虫感染后显著升高,在免疫后呈增强趋势。研究结果提示Raf-MEK-ERK级联参与了寄生虫感染的应答。对MHC Ⅱ抗原提呈通路相关的六个基因（CTSB,CTSL,CTSS,GILT,MHC ⅡA和MHC ⅡB）在感染刺激隐核虫后的石斑鱼表达水平检测显示,在几乎所有检测时间点中,皮肤组织检测的所有的这六个基因基本都出现上调。并且在所有检测时间点上,除了CTSS基因,脾脏组织检测的五个基因基本都出现上调。鳃和头肾组织中,在某些时间点上,CTSB、CTSL和MHC Ⅱ基因出现了上调。相关结果表明,刺激隐核虫感染后,石斑鱼的MHC Ⅱ抗原呈递主要发生在皮肤组织和鳃组织中。综上所述,刺激隐核虫感染石斑鱼后,可以激活MEK1/2-ERK1/2通路,Raf-MEK-ERK级联反应引起宿主的抗病毒或寄生虫感染的应答,并由经MHCⅡ抗原递呈途径激活宿主的特异性抗体免疫应答。