论文部分内容阅读
目的:本研究通过观察不同剂量的枸椽酸芬太尼对人肝癌细胞BEL-7404生长与凋亡的影响并分析其可能机制,以期为芬太尼在癌症患者治疗中提供临床指导。方法:实验分为5组:对照组,5ng/ml芬太尼组,50ng/m1芬太尼组,500ng/ml芬太尼组,5000ng/ml芬太尼组。人肝癌BEL-7404细胞培养至对数生长期,随机分5组,5ng/m1芬太尼组,50ng/ml芬太尼组,500ng/ml芬太尼组,5000ng/m1芬太尼组分别将芬太尼加入细胞培养液中,使芬太尼最终浓度分别为5ng/m1、50ng/ml,、500ng/ml和5000ng/m1,对照组不加芬太尼,继续孵育。倒置显微镜观察各组细胞形态变化,划痕实验检测各组细胞的迁移能力,噻唑蓝(MTT)法和克隆形成实验观察细胞生长增殖的变化,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的变化。结果:倒置显微镜观察显示,5ng/ml芬太尼组、50ng/ml芬太尼组、500ng/ml芬太尼组、5000ng/ml芬太尼组人肝癌BEL-7404细胞生长速度均慢于对照BEL-7404细胞生长速度,且对照组细胞贴壁生长,5ng/ml芬太尼组、50ng/ml芬太尼组、500ng/m1芬太尼组、5000ng/m1芬太尼组人肝癌BEL-7404细胞均有变小,变圆,折光性增强,等现象;5ng/m1芬太尼组、50ng/ml芬太尼组、500ng/m1芬太尼组、5000ng/ml芬太尼组人肝癌BEL-7404细胞的迁移能力明显降低,24小时迁移率分别为(41.29±0.937)%、(33.65±2.007)%、(27.63±1.270)%与(19.38±1.563)%,明显低于对照组的迁移率(46.48±1.410)%(P<0.05)。实验组的OD值较对照组显著下降(P<0.05),芬太尼对BEL-7404细胞的抑制率也逐渐增加,24小时5ng/ml芬太尼组、50ng/ml芬太尼组、500ng/ml芬太尼组和5000ng/ml芬太尼组抑制率分别为6.1%、10.3%、17.5%与21.0%;5ng/ml芬太尼组、50ng/ml芬太尼组、500ng/ml芬太尼组、5000ng/m1芬太尼组人肝癌BEL-7404细胞的克隆形成率分别为(10.48±0.43)%、(8.06±0.37)%、(6.66±0.28)%与(4.48±0.45)%,低于对照组细胞的克隆形成率(12.59±0.32)%(P<0.05);5ng/ml芬太尼组、50ng/ml芬太尼组、500ng/ml芬太尼组、5000ng/m1芬太尼组人肝癌BEL-7404细胞停滞在G0/G1期的比例增加,S期比例减少;5ng/m1芬太尼组、50ng/ml芬太尼组、500ng/ml芬太尼组、5000ng/ml芬太尼组人肝癌BEL-7404细胞的凋亡率分别为(26.27±2.08)%、(28.88±1.06)%、(32.10±1.4)%或(47.27±1.33)%,都明显高于对照组的凋亡率(10.71±1.8)%(P<0.05);。结论:枸椽酸芬太尼促进人肝癌BEL-7404细胞的凋亡,使细胞周期停滞于G0/G1期,降低人肝癌细胞的迁移能力,从而抑制人肝癌BEL-7404细胞的生长增殖。