【摘 要】
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快生型苜蓿根瘤菌Rm1021有鸟氨酸环化脱氨酶活性,可把鸟氨酸转化成为脯氨酸进一步进行代谢,因此,可以鸟氨酸或脯氨酸作为唯一碳源和氮源生长.本研究采用自杀质粒Pk18mob构建
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快生型苜蓿根瘤菌Rm1021有鸟氨酸环化脱氨酶活性,可把鸟氨酸转化成为脯氨酸进一步进行代谢,因此,可以鸟氨酸或脯氨酸作为唯一碳源和氮源生长.本研究采用自杀质粒Pk18mob构建了10个同源单交换重组质粒,通过三亲本接合或电转化方法导入Rm1021,得到8个Rm1021派生突变体.SMC01053无论是极性突变还是非极性突变都能以脯氨酸或鸟氨酸为唯一碳源和氮源,在TY中和出发菌株没有大的区别,在脯氨酸中生长稍微滞后于出发菌株.SMC01054,SMC02124,SMC02123,SMC02122无论是非极性突变还是极性突变都可以在脯氨酸培养基中生长,在脯氨酸中生长滞后于出发菌,而不能以鸟氨酸为唯一碳源和氮源进行代谢.以费氏中华根瘤菌HN01基因文库中含有和SMC02123,SMC02122同源片段的pGXHN200为供体,通过三亲本接合或电转化导入SMC02123F/Rm1021,SMC02122/Rm1021,得到互补菌rSMC02123F/Rm1021,rSMC02122F/Rm1021,在以鸟氨酸为唯一碳源和氮源的培养基中恢复了代谢鸟氨酸的能力.我们认为SMC01054,SMC02124,SMC02123,SMC02122和鸟氨酸代谢有关,SMC01053和鸟氨酸代谢关系不大.
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