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目的(1)观察人参皂苷Rb1对单纯性肥胖的作用;(2)探索人参皂苷Rb1在分化成熟3T3-L1脂肪细胞中对脂质转运的作用(3)明确人参皂苷Rb1是否通过PPARγ/AQP7途径发挥改善肥胖的作用。方法体内实验,采用4-5周龄的C57BL/6雄性小鼠给予高脂饮食(脂肪含量60%)喂养,构建单纯性肥胖模型构,进行相应药物(人参皂苷Rb1、PPARγ抑制剂GW9662、DMSO)处理,检测小鼠体质量、体脂量、脂肪细胞大小,糖耐量试验,血清学检测血脂、血糖、肝功能变化。免疫组化分析脂肪组织内AQP7、PPARγ的定位表达,Western-blot测定脂肪组织中AQP7、PPARγ、p-PPARγ的表达量。体外实验,采用3T3-L1细胞诱导成为成熟的脂肪细胞,不同浓度的Rb1处理筛选出最适浓度,其后将细胞分为空白对照组、Rb1组、GW9662+Rb1组、DMSO+Rb1组。油红O染色观察细胞内脂滴大小及其含量,ELISA试剂盒检测细胞培养基中游离三酯甘油、瘦素、脂联素表达量,Western-blot测定脂肪组织中AQP7、PPARγ、p-PPARγ的表达量。结果1.与普食对照组小鼠体质量比较,高脂饮食小鼠体质量约为普食组小鼠体质量的1-1.5倍,单纯性肥胖小鼠模型造模成功。2.与对照组相比较,人参皂苷Rb1处理组(HFD+Rb1)的肥胖小鼠体质量和体脂率降低,差异有统计学意义(P<0.05),比较HFD+Rb1组与HFD+GW9662+Rb1组肥胖小鼠体质量以及体脂率,给予肥胖小鼠PPARγ特异性抑制剂GW9662处理后可部分逆转Rb1减轻体质量以及体脂率的作用。3.IPGTT法检测肥胖小鼠糖耐量,与对照组比较,HFD+Rb1组肥胖小鼠血糖调节能力较强,差异有统计学意义(P<0.01);而HFD+GW9662+Rb1组肥胖小鼠的血糖调节能力较HFD+Rb1组弱,差异有统计学意义(P<0.01)4.HFD+Rb1组肥胖小鼠血清中游离脂肪酸水平明显低于其他组,但TG、LDL-C、HDL-C、CHO以及血糖水平无明显统计学差异。5.与对照组相比,HFD+Rb1组肥胖小鼠血清中AST和ALT水平较低,差异有统计学意义(P<0.05),HFD+Rb1组肥胖小鼠血清AST水平低于HFD+GW9662+Rb1组,差异有统计学意义(P<0.05),而ALT水平未见明显统计学差异6.Rb1处理组肥胖小鼠的脂肪细胞直径明显较对照组以及HFD+GW9662+Rb1组小,差异有统计学意义(P<0.01),HFD+DMSO+Rb1组肥胖小鼠脂肪细胞直径明显小于HFD+GW9662+Rb1组,差异有统计学意义(P<0.01)。7.HFD+Rb1组肥胖小鼠脂肪总蛋白中AQP7、PPARγ、p-PPARγ蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05)以及HFD+GW9662+Rb1组(P<0.01),差异有统计学意义。HFD+DMSO+Rb1组中上述蛋白表达水平均高于HFD+GW9662+Rb1组,但四组肥胖小鼠脂肪蛋白中p-PPARγ(ser112)/PPARγ水平未见明显差异。8.体外实验中,经不同浓度刺激分化成熟3T3-L1细胞,筛选出最适Rb1作用浓度为40umol/L。9.体外实验中,人参皂苷Rb1处理组以及DMSO+Rb1处理组的分化成熟3T3-L1细胞中脂滴大小明显较对照组以及GW9662+Rb1组小,且Rb1组与DMSO+Rb1组培养基中游离三酯甘油水平较其他两组高。10.与对照组相比,人参皂苷Rb1处理组促进分化成熟3T3-L1脂肪细胞脂联素的分泌(P<0.05),抑制瘦素的分泌(P<0.01),差异有统计学意义。11.体外实验中,人参皂苷Rb1处理组的分化成熟3T3-L1脂肪细胞蛋白中AQP7、PPARγ、p-PPARγ表达水平明显较对照组高,且DMSO+Rb1组上述蛋白表达水平高于GW9662+Rb1组,差异有统计学意义(P<0.01),但四个组p-PPARγ(ser112)/PARγ表达水平未见明显统计学差异。结论1.人参皂苷Rb1明显减轻肥胖小鼠的体质量、降低体脂重量,减小脂肪细胞大小,降低肥胖小鼠血清中游离脂肪酸水平,且有保护肥胖小鼠肝功能的作用;2.人参皂苷Rb1促进分化成熟3T3-L1脂肪细胞内三酯甘油的排出,改善分化成熟3T3-L1脂肪细胞内分泌功能,促进脂联素分泌,减少瘦素分泌;3.人参皂苷Rb1通过PPARγ影响AQP7表达,最终发挥调节脂质转运的作用。