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目的建立体外分离、培养兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的方法。初步探讨BMSCs可定向分化为成骨细胞、软骨细胞的途径。方法抽取家兔骨髓液,用淋巴细胞分离液梯度离心获得单个核细胞,经原代培养及传代培养,选择状态良好、经过3次传代的细胞与原代细胞一起用于下面实验。(1)诱导BMSCs向成骨细胞转化：向培养液内加入地塞米松1×10-7mol／L,B-磷酸甘油钠10mmol/L,维生素C50μg/mL诱导培养后,行碱性磷酸酶活性检查和Von kossa染色检查。(2)向培养基中添加不同质量浓度bFGF,行MTT检测(3)诱导BMSCs向软骨细胞转化：向培养液内加入地塞米松1×10-7mol／L、维生素C50μg/mL bFGF10ng/mL,培养1周后将bFGF换为TGF-β10ng/mL,继续培养3周,行甲苯胺蓝染色,RT-PCR技术检测Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达。结果(1)经地塞米松、B-磷酸甘油钠及维生素C诱导培养3-4周后,BMSCs转化为成骨细胞,实验组ALP活性明显高于对照组,Von kossa染色阳性。(2)10ng／mL的bFGF对BMSCs的促增值能力最强。(3)BMSCs经软骨诱导分化后骨髓间充质干细胞呈软骨细胞形态,甲苯胺蓝染色阳性,PCR证实转化前的细胞主要表达Ⅰ型胶原mRNA.转化后的细胞主要表达Ⅱ型胶原mRNA.Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达阳性。结论兔骨髓间充质干细胞可定向分化为成骨细胞、软骨细胞。