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目的探究大肠癌细胞中miR-449a表达情况及miR-449a在大肠癌细胞的凋亡及细胞周期的影响。方法37℃、双气、100%湿度的细胞培养箱无菌培养人大肠癌HCT15、HT29、SW480、LOVO细胞株及人大肠正常黏膜细胞系NCM460,每种细胞分别取状况优良的正常生长期细胞利用qRT-PCR来测定各种细胞miR-449a含量,从而挑出最优的大肠癌细胞种群;将大肠癌细胞系LOVO通过脂质体Lipofectamine TM 2000进行转染实验,分别相应处理:空白组、上调对照组、上调组、下调对照组、下调组;利用qRT-PCR测定LOVO细胞各个分组中的miR-449a含量验证转染效果;利用TUNEL法荧光测定细胞凋亡试剂盒处理不同分组间来测定凋亡比例;采用细胞周期检测试剂盒,利用流式仪测定不同处理组细胞间周期情况;Western blot测定LOVO各处理间与凋亡有关蛋白如Bcl-2、Bax及Caspase-3的变化;用SPSS Statistic 22.0数据统计分析软件分析各细胞实验组数据。结果1 qRT-PCR结果显示:miR-449a在人大肠癌细胞HCT15、HT29、SW480、LOVO的表达量均低于人大肠正常黏膜细胞系NCM460,其中LOVO的表达量最低(P<0.001)。2 qRT-PCR测定转染效率结果显示:在LOVO细胞中,miR-449a在上调组中的表达量显著高于上调NC组,在下调组中的表达量低于下调NC组(P均<0.05)。3 Tunel法检测细胞凋亡显示:在LOVO中,与上调NC组及空白组相比,上调组的凋亡比例显著升高(P<0.001)。4流式细胞术测定细胞周期实验:在LOVO中,与上调NC组及空白组相比,上调组位于G0/G1期的百分比升高,显著阻滞于G0/G1期(P<0.05)。5 Western blot测定结果显示:在LOVO中,于上调NC组及空白组相比,上调组的Bcl-2蛋白表达水平下降,而Bax及Capase-3表达水平显著上调(P均<0.05)。结论1 miR-449a在大肠癌细胞株内表达水平上调,且LOVO内miR-449a含量最低。2上调miR-449a可以诱导大肠癌细胞的凋亡,同时可以将细胞阻滞在G0/G1期。3 miR-449a可能是通过调控Bcl-2蛋白,发挥加速大肠癌细胞凋亡的作用。图5幅;表9个;参170篇。