研究背景及目的：　　宫颈癌(Cervical cancer,CC)是女性第二常见的恶性肿瘤，也是发展中国家妇女癌症死亡的第三大原因。宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasia，CIN)属于宫颈癌的癌前病变，是一系列宫颈鳞状上皮病变的统称，可以发展成为鳞状上皮浸润癌。宫颈癌的发生和发展是一个相当复杂的生物过程，与多种因素有关，其中人乳头瘤病毒(Humanpapillomavirus，HPV)感染是宫颈癌的主要危险因素。宫颈癌的侵袭需要突破基底膜，与细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)密切相关。ECM中，基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases，MMPs)是金属内肽酶类的一员，可以水解ECM中的多种蛋白，破坏细胞屏障及基底膜，从而促进肿瘤细胞的迁移及侵袭。大量文献报道MMPs，特别是MMP-2及MMP-9高表达于多种肿瘤组织中，并在肿瘤的形成及发展中起着重要的作用。近年来研究显示MMP-2及MMP-9在宫颈癌及癌前病变中呈现过度表达，并且对宫颈癌具有一定的诊断及预后评价价值。一些证据显示MMP-2及MMP-9的表达及活性与正常宫颈组织向CIN的发展，并最终演变为宫颈癌的过程密切相关。然而，以往关于MMP-2及MMP-9与宫颈癌的关系的研究存在片面性，大多采用组织免疫的方法检测MMPs的表达情况，操作繁琐。此外，MMP-2及MMP-9与中国人群宫颈癌的关系的临床研究，以及其作为诊断及预后的特异性及敏感性却鲜有报道。因此，本研究第一部分旨在分析正常者、CIN患者及宫颈癌患者血清中的MMP-2及MMP-9表达情况，探索血清ELISA法用于检测宫颈癌生物指标的可行性，同时探索MMP-2及MMP-9的表达水平与CIN及宫颈癌发病、进展、预后的关系，探讨其作为宫颈癌诊断、发展及预后指标及危险因子的可能性。　　基因多态性在多种病理生理过程如肿瘤中起着重要作用。其中，单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms，SNPs)是人类基因最常见的遗传变异，被认为是新一代的遗传标记。研究证明多种基因的SNP多态性因其可调节DNA错配修复、细胞周期、代谢及免疫而与肿瘤的遗传易感性密切相关。其中基因启动子的SNP可以通过作用于各种转录因子而调节基因的转录活性。研究显示，MMP-2启动子区域SNP rs2285053、rs243865及MMP-9rs3918242多态性能影响基因的转录活性并改变蛋白表达水平，与肿瘤的遗传易感性密切相关。然而，MMP-2及MMP-9启动子SNPs多态性与宫颈癌的发病风险之间的关系却很少有研究报道。因此，本研究第二部分内容旨在探讨MMP-2rs2285053及MMP-9rs3918242多态性基因型分布，研究其与宫颈癌遗传易感性、发展及预后的关系，并分析HPV感染、MMP-2rs2285053及MMP-9rs3918242多态性的交互作用。　　研究方法：　　1.MMP-2及MMP-9与宫颈癌及其癌前病变的关系分析研究:选择2013年06月-2014年09月我院门诊及住院的女性患者共86例，其中宫颈癌的患者35例，CIN患者51例，选择正常宫颈上皮共29例作为对照组。收集病例的一般资料，采集静脉血，采用ELISA法分析三组血清样本MMP-2及MMP-9的表达水平。分析CIN及宫颈癌的危险因素（年龄及HPV感染）。比较三组病例血清MMP-2及MMP-9表达水平，受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve，ROC)分析二者对CIN发生、分级、病程演化，以及宫颈癌发生、临床分期、转移、复发及预后的预测的敏感性及特异性，多元回归分析二者与CIN及宫颈癌的相关性。　　2.MMP-2及MMP-9基因多态性与宫颈癌易感性相关分析研究:选择2010年12月-2014年9月我院被诊断为宫颈癌的患者150例，正常对照者120例，采集病例静脉血，提取血液DNA，采用限制性片段长度多态性-聚合酶链反应(PCR-RFLP)分析样本的基因型及等位基因。统计分析比较两组病例MMP-2rs2285053及MMP-9rs3918242的SNP多态性基因型频率及等位基因频率，多元回归分析其对宫颈癌及其分期、淋巴结转移的相关关系。采用调节效应回归模型分析HPV感染、MMP-2与MMP-9SNPs多态性的相互作用与宫颈癌易感性、转移及复发的关系。　　研究结果：　　1.宫颈癌患者合并HPV感染率(77.1％)显著高于CIN患者(54.9％)及正常对照组(27.6％)(P＜0.05);HPV感染是CIN及宫颈癌发生的危险因素(CIN:OR=3.196,P=0.021,95％CI=1.195-8.545;宫颈癌:OR=5.123,P=0.010,95％CI=1.482-17.718）;宫颈癌组患者血清MMP-2及MMP-9表达水平显著高于CIN组(P=0.000)及正常组(P=0.000)，二者对CIN及宫颈癌发生的诊断特异性及敏感性具有显著性统计学意义(AUC＞0.648，P＜0.05)，MMPs的高表达是CIN及宫颈癌发生的危险因素(P＜0.008，OR＞3.28);亚组分析发现，CIN分级越高，其MMP-9及MMP-2血清水平越高，血清中MMP-2及MMP-9表达水平可作为CIN分级的诊断指标(P＜0.05)，随着MMP-2及MMP-9血清浓度的增加，患者发生HSIL的危险系数增加(OR＞1.98，P＜0.05);随着宫颈癌分期的增加，患者血清MMP-2及MMP-9浓度也随之增加(P＜0.05)，尽管二者对宫颈癌Ⅰ期及Ⅱ期的诊断效能不高(AUC＜0.55，P＞0.05)，但可作为宫颈癌分期的诊断指标(P＜0.05)，随着二者浓度的增加，宫颈癌患者发生肿瘤浸润及转移的危险系数增加(OR＞3.18，P＜0.05)。发展成为宫颈癌的CIN患者初始血清MMP-9表达水平显著高于未发展成为宫颈癌的CIN患者，而MMP-2水平无显著差异(P＞0.05);当CIN患者血清MMP-9大于172.26ng/mL时，其3年内演变成宫颈癌的可能性较大(P=0.009);MMP-9浓度大于147.1ng/mL时，CIN患者（主要为CINⅡ/Ⅲ）演变成为宫颈癌的风险明显增加(OR=2.73)。复发宫颈癌患者的血清初始MMP-2及MMP-9的水平均显著高于未复发的宫颈癌的患者（P值分别为0.002及0.024）;当MMP-2大于74.16ng/mL时或MMP-9大于203.22ng/mL时，3年内宫颈癌患者复发的可能性较大((MMP-2:AUC=0.801，P=0.003;MMP-9:AUC=0.720，P=0.031);患者初始血清MMP-2及MMP-9水平越高，宫颈癌的复发的风险就越高(MMP-2:P=0.001，校正OR=4.58，95％CI=1.02-19.25;MMP-9:P=0.017，校正OR=2.83，95％CI=0.77-14.63)。此外，同时具有较高MMP-2及MMP-9水平的患者发生CIN及宫颈癌的风险、HSIL、CIN向宫颈癌演变、宫颈癌浸润转移及复发的风险均较高(OR＞2)。血清初始MMP-2及MMP-9低表达的患者中位生存时间显著高于高表达的患者（P值分别为0.000及0.000）。　　2.150例宫颈癌患者MMP-2rs228505的基因型频率（CC、CT及TT）分别为77.3％、22.7％及0％，等位基因频率（C及T）分别为88.7％及11.3％;MMP-9rs3918242的基因型频率（CC、CT及TT）分别为77.3％、20.0％及2.7％，等位基因频率（C及T）分别为86.0％及14.0％，二者与正常对照者比较均无显著性差异(P＞0.05)。MMP-2rs2285053及MMP-9rs3918242基因多态性与宫颈癌淋巴结转移情况、分期、复发及生存期均无明显的相关关系(P＞0.05，OR＜1)。交互作用分析结果显示:MMP-2rs2285053及MMP-9rs3918242存在交互作用，二者交互作用与宫颈癌的易感性(OR=0.135，95％CI=0.028-0.660)、淋巴结转移（OR=0.094，95％=0.013-0.467）及肿瘤复发(OR=0.115，95％=0.019-0.738)有明显的关系;MMP-2SNP多态性与HPV感染的相互作用与宫颈癌的易感性(OR=0.147，95％CI=0.038-0.594)有明显关系，而与宫颈癌的淋巴结转移及复发无明显关系(P＞0.05);MMP-9SNP多态性与HPV感染的相互作用与宫颈癌易感性(OR=2.044，95％CI=1.124-4.698)、淋巴结转移(OR=3.359，95％CI=1.171-5.643)及复发(OR=0.148，95％CI=0.363-2.495)均有明显的关系。　　主要结论：　　1.HPV感染是CIN及宫颈癌发生的主要危险因素;MMP-2及MMP-9与CIN及宫颈癌发生、发展及预后的易感性或风险明显相关，并可作为其血清学生物指标，且MMP-9的诊断效能较MMP-2高。　　2.MMP-2rs2285053及MMP-9rs3918242基因多态性与宫颈癌的易感性、发展及预后的危险性无明显关系;但HPV感染、MMP-2及MMP-9基因多态性三者间的交互作用与宫颈癌的发生、发展及预后有关。