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肝缺血再灌注损伤（Ischemia-reperfusion injury,IRI）作为关键且常发的一种手术并发症,一直是肝切除手术和肝移植等肝手术中难以避免的病理生理现象,减轻肝IRI对临床诊疗是一个挑战。氢分子由于其选择性抗氧化、抗凋亡和抗炎等作用而广泛应用于缺血再灌注这一常见手术并发症的研究中,但氢分子在IRI中的生物学效应仍有待进一步研究,因此本实验利用氢气发生器将H2饱和溶解在生理盐水中,制成富氢生理盐水（Hydrogen-rich saline,HRS）,用以研究HRS对腹腔镜肝IRI合并肝部分切除手术中肝脏的保护作用及其对肝细胞自噬的影响。本实验建立了相关损伤的小型猪腹腔镜手术模型,将18头小型猪随机分为3组:假手术组（Sham组）,模型组（IRI组）和HRS干预组（HRS组）。各组均采用同样的麻醉、气腹方式和相同的手术通路,Sham组只行麻醉和气腹,并在腹腔镜下翻动肝叶。IRI组和HRS组在常规麻醉、建立气腹和手术通路后,进行右半肝缺血60 min,左半肝切除术。HRS组在缺血后行肝门静脉插管,于再灌注前10 min经门静脉置管滴注HRS（10 mL/kg）进行干预,并在术后1 d、2 d、3 d分别于门静脉滴注HRS（10 mL/kg）。各组在术中监测呼吸,麻醉,心率,血压,体温等生理指标,确保手术安全进行。三组分别于术前,再灌注即刻（0h）,再灌注3 h（3h）,术后1 d（1d）和术后3 d（3d）采集血液以及肝组织样本待检。采用生化方法检测血清各个时间点肝功能（AST、ALT、ALP）情况;采用试剂盒的方法评估肝组织氧化应激标志物（MDA、SOD、GSH、CAT）的水平;通过实时荧光定量PCR方法检测肝组织中自噬相关基因（Beclin 1,P62,ATG5,ATG12,mTOR）的转录水平;采用Western blot方法检测肝组织中Beclin 1,P62和LC3B蛋白表达水平;用免疫组化法检测肝组织LC3B表达;利用透射电镜观察肝细胞亚显微结构的变化。结果显示,三组腹腔镜手术均顺利完成,术后无严重并发症发生。与Sham组比较,IRI组血清中肝功能指标AST、ALT、ALP在再灌注即刻,再灌注3 h以及术后1 d升高且差异极显著（P<0.01）,对再灌注3 h的肝组织进行电镜检测可见肝细胞发生线粒体肿胀,内质网扩张等明显损伤;氧化应激结果显示,在再灌注即刻,再灌注3 h,术后1 d肝组织SOD、CAT、GSH的含量明显降低,MDA水平明显升高且差异极显著（P<0.01）;自噬相关基因的检测结果显示于再灌注即刻,再灌注3 h和术后1 d Beclin 1、ATG5、ATG12的mRNA表达量明显升高,mTOR和P62的mRNA表达量明显降低且差异极显著（P<0.01）,Western Blot检测显示于再灌注即刻,再灌注3 h,Beclin 1及LC3B蛋白表达量升高,P62蛋白表达降低且差异极显著（P<0.01）,再灌注3 h的肝组织免疫组化显示LC3B表达量升高且差异极显著（P<0.01）。HRS干预后,与IRI组相比,HRS组各项肝功能指标在术后1 d均明显降低且差异极显著（P<0.01）,再灌注3 h时肝细胞亚显微结构损伤较轻;氧化应激指标显示于再灌注3 h和术后1 d肝组织SOD、CAT、GSH水平升高,MDA水平降低且差异显著或极显著（P<0.05或P<0.01）;自噬相关基因及蛋白检测显示,于再灌注3 h Beclin 1、ATG12和ATG5的基因表达量降低,mTOR、P62的基因表达量升高,LC3B及Beclin1的蛋白表达量降低,P62的蛋白表达量升高且差异显著或极显著（P<0.05或P<0.01）。以上实验结果表明:（1）HRS干预能够减轻腹腔镜下肝IRI合并肝部分切除术中肝功能损伤,降低肝组织氧化应激水平,对肝脏具有保护作用。（2）HRS干预降低了腹腔镜下肝IRI合并肝部分切除损伤造成的肝细胞自噬的升高。