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目的:选取临床上已取得明显疗效的妇炎舒胶囊,观察其对PID模型大鼠子宫组织中Bcl相关的x蛋白基因(Bax)、B淋巴细胞瘤-xl(Bcl-xl)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、前B细胞克隆增强因子(PBEF)等4个因子的含量及子宫组织中PBEFmRNA的表达影响,探讨盆腔炎的可能发病机制及妇炎舒胶囊治疗PID的作用机制,为今后临床应用妇炎舒胶囊治疗盆腔炎性疾病的疗效机制提供实验研究依据。
方法:选取42只8周龄SPF级雌性大鼠,适应性喂养一周后随机选取健康大鼠6只行假手术操作,剩余36只大鼠进行造模。采用混合菌液注射+机械损伤法造模,造模后适应性喂养7天,将造模成功的模型大鼠随机分为6组(妇炎舒胶囊高、中、低剂量组、康妇炎胶囊组、头孢克肟胶囊组、模型组),每组6只,连续治疗14天后,将大鼠的子宫进行病理切片,HE染色后在显微镜下观察子宫组织形态学的改变,并对其炎症程度进行分级评分,运用RT-PCR检测子宫组织PBEFmRNA的表达,Elisa法检测子宫组织中Bax、Bcl-xl、Caspase-3、PBEF等4个因子的含量变化。
结果:
(1)大鼠子宫炎症病理改变评分:与空白组相比,模型组大鼠子宫炎症病理评分显著升高,其差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,头孢克肟胶囊组、康妇炎胶囊组和妇炎舒胶囊高剂量组评分显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);妇炎舒胶囊中剂量组以及低剂量组评分有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。
(2)子宫组织中Bax的含量:与空白组相比,模型组大鼠子宫组织中Bax浓度明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,各用药组大鼠子宫组织中Bax浓度有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。
(3)子宫组织中Bcl-xl的含量:与空白组相比,模型组大鼠子宫组织中Bcl-xl浓度明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,妇炎舒胶囊高剂量组大鼠子宫组织中Bcl-xl浓度显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);其余各组大鼠子宫组织中Bcl-xl浓度有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。
(4)子宫组织中Caspase-3的含量:与空白组相比,模型组大鼠子宫组织中Caspase-3浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,妇炎舒胶囊高剂量组,康妇炎胶囊组大鼠子宫组织中Caspase-3浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05);其余各组大鼠子宫组织中Caspase-3浓度无明显差异(P>0.05)。
(5)子宫组织中PBEF的含量:与空白组相比,模型组大鼠子宫组织中PBEF浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,妇炎舒胶囊高剂量组、康妇炎胶囊组、头孢克肟胶囊组大鼠子宫组织中PBEF浓度明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),其余各组大鼠子宫组织中PBEF浓度有降低趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。
(6)大鼠子宫组织中PBEFmRNA的表达:与空白组相比,模型组大鼠子宫组织中PBEFmRNA表达水平显著增加,差异极显著(P<0.01);与模型组相比,头孢克肟胶囊组、康妇炎胶囊组、妇炎舒胶囊高剂量组大鼠子宫中PBEFmRNA表达降低,差异显著(P<0.05);妇炎舒胶囊低剂量组、中剂量组大鼠子宫中PBEFmRNA表达有降低趋势,但差异不具备统计学意义(P>0.05)。
(7)相关性分析:选择各组实验数据进行相关性分析,Bax蛋白的表达与Bcl-xl蛋白的表达呈正相关,相关性系数=0.381,相关性有统计学意义(P<0.05);PBEF的表达与Caspase-3的表达呈负相关,相关性系数=-0.364,相关性有统计学意义(P<0.05);其余指标之间的相关性无统计学意义(P>0.05)。
结论:
1.本实验采用混合菌液注射+机械损伤法造模,模型组子宫炎症病理评分明显升高,且子宫组织切片镜下见大量中性粒细胞浸润,提示本次造模成功;
2.妇炎舒胶囊可降低PID模型大鼠子宫组织炎症病理改变评分,减轻大鼠子宫炎症,说明妇炎舒胶囊对PID有治疗作用;
3.盆腔炎性疾病的发病机制可能与细胞凋亡相关,妇炎舒胶囊能减轻大鼠子宫炎性病理改变,其机制可能是通过降低PBEF表达,同时下调Bcl-xL蛋白的表达水平,上调Caspase-3表达,从而调节炎性细胞凋亡,最终达到治疗PID的作用机制。
方法:选取42只8周龄SPF级雌性大鼠,适应性喂养一周后随机选取健康大鼠6只行假手术操作,剩余36只大鼠进行造模。采用混合菌液注射+机械损伤法造模,造模后适应性喂养7天,将造模成功的模型大鼠随机分为6组(妇炎舒胶囊高、中、低剂量组、康妇炎胶囊组、头孢克肟胶囊组、模型组),每组6只,连续治疗14天后,将大鼠的子宫进行病理切片,HE染色后在显微镜下观察子宫组织形态学的改变,并对其炎症程度进行分级评分,运用RT-PCR检测子宫组织PBEFmRNA的表达,Elisa法检测子宫组织中Bax、Bcl-xl、Caspase-3、PBEF等4个因子的含量变化。
结果:
(1)大鼠子宫炎症病理改变评分:与空白组相比,模型组大鼠子宫炎症病理评分显著升高,其差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,头孢克肟胶囊组、康妇炎胶囊组和妇炎舒胶囊高剂量组评分显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);妇炎舒胶囊中剂量组以及低剂量组评分有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。
(2)子宫组织中Bax的含量:与空白组相比,模型组大鼠子宫组织中Bax浓度明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,各用药组大鼠子宫组织中Bax浓度有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。
(3)子宫组织中Bcl-xl的含量:与空白组相比,模型组大鼠子宫组织中Bcl-xl浓度明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,妇炎舒胶囊高剂量组大鼠子宫组织中Bcl-xl浓度显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);其余各组大鼠子宫组织中Bcl-xl浓度有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。
(4)子宫组织中Caspase-3的含量:与空白组相比,模型组大鼠子宫组织中Caspase-3浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,妇炎舒胶囊高剂量组,康妇炎胶囊组大鼠子宫组织中Caspase-3浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05);其余各组大鼠子宫组织中Caspase-3浓度无明显差异(P>0.05)。
(5)子宫组织中PBEF的含量:与空白组相比,模型组大鼠子宫组织中PBEF浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,妇炎舒胶囊高剂量组、康妇炎胶囊组、头孢克肟胶囊组大鼠子宫组织中PBEF浓度明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),其余各组大鼠子宫组织中PBEF浓度有降低趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。
(6)大鼠子宫组织中PBEFmRNA的表达:与空白组相比,模型组大鼠子宫组织中PBEFmRNA表达水平显著增加,差异极显著(P<0.01);与模型组相比,头孢克肟胶囊组、康妇炎胶囊组、妇炎舒胶囊高剂量组大鼠子宫中PBEFmRNA表达降低,差异显著(P<0.05);妇炎舒胶囊低剂量组、中剂量组大鼠子宫中PBEFmRNA表达有降低趋势,但差异不具备统计学意义(P>0.05)。
(7)相关性分析:选择各组实验数据进行相关性分析,Bax蛋白的表达与Bcl-xl蛋白的表达呈正相关,相关性系数=0.381,相关性有统计学意义(P<0.05);PBEF的表达与Caspase-3的表达呈负相关,相关性系数=-0.364,相关性有统计学意义(P<0.05);其余指标之间的相关性无统计学意义(P>0.05)。
结论:
1.本实验采用混合菌液注射+机械损伤法造模,模型组子宫炎症病理评分明显升高,且子宫组织切片镜下见大量中性粒细胞浸润,提示本次造模成功;
2.妇炎舒胶囊可降低PID模型大鼠子宫组织炎症病理改变评分,减轻大鼠子宫炎症,说明妇炎舒胶囊对PID有治疗作用;
3.盆腔炎性疾病的发病机制可能与细胞凋亡相关,妇炎舒胶囊能减轻大鼠子宫炎性病理改变,其机制可能是通过降低PBEF表达,同时下调Bcl-xL蛋白的表达水平,上调Caspase-3表达,从而调节炎性细胞凋亡,最终达到治疗PID的作用机制。