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目的1通过建立胶原诱导性关节炎(Collagen Induced Arthritis,CIA)小鼠模型,检测CIA小鼠膝关节滑膜液的炎症指标,小鼠膝关节滑膜1-醇激酶(sphingosine kinases,SphK1)、1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)和S1P裂解酶(phingosine-1-phosphate lymphoid,S1PL)表达的影响,来评价麝香乌龙丸对CIA小鼠的疗效机制,为麝香乌龙丸在临床上治疗类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)提供实验及理论依据。方法1.在45只DBA/1J小鼠中随机抓取30只作为造模组,剩下的15只则为对照组。造模过程分为首次免疫反应和在在第21天的二次免疫反应。2.制造模型在造模组的小鼠鼠尾的尾根皮下注入为0.1mlCII乳剂,该乳剂是由弗氏完全佐剂和牛II型胶原乙酸溶液等量相互融合制成的。制造CIA模型,当呈现出继发性关节炎症状的小鼠时,则是制造病态模型成功。3.分组从成功造模的小鼠里面中随机挑选15只作为治疗组进行给药治疗,15只作为模型组处理。给药治疗组于第22天开始,进行麝香乌龙丸悬浊溶液灌胃处理,对照组和模型组则是相同体积的生理盐水灌胃。连续灌胃处理21天,于第43天取滑膜液和滑膜。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(Elisa)测量小鼠滑膜液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、1-酸鞘胺醇(S1P)、干扰素-γ(IFN-γ)和血清中S1P浓度,以评估小鼠炎症水平。4.蛋白免疫印迹试验(Western Blot)和免疫组织化学染色测定小鼠膝关节滑膜组织SphK1、S1P和S1PL三种细胞蛋白的表达水平。结果1.与对照组进行相比,CIA模型组小鼠滑膜液中TNF-α、IL-6、IFN-γ和S1P的浓度明显升高,而血清中的S1P浓度下降,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组小鼠滑膜液中TNF-α、IL-6、IFN-γ和S1P的浓度与CIA模型组相比显著降低,而血清中的S1P浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05);2.Western Blot结果显示,CIA模型组滑膜组织SphK1、S1P和S1PL蛋白相对表达量明显高于对照组,差异有显著意义(P<0.05);经麝香乌龙丸治疗后,CIA小鼠滑膜组织SphK1、S1P和S1PL蛋白表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);3.免疫组化结果显示,CIA模型组滑膜组织S1P、SphK1和SS1PL的阳性表达和平均光密度值显著多于对照组(P<0.05);经麝香乌龙丸治疗后,CIA小鼠膝关节滑膜组织中的SphK1、S1P和S1PL的阳性表达和平均光密度值显著减少(P<0.05)。结论1麝香乌龙丸有效降低CIA小鼠的关节滑膜液中炎症因子含量。2麝香乌龙丸能够抑制膝关节滑膜S1PL、SphK1和S1P的蛋白表达。图5幅;表1个;参187篇。