论文部分内容阅读
本文概述了蛋白质分离纯化技术的现状,介绍了分离纯化蛋白质的几种主要方法以及蛋白质含量的检测方法。介绍了肌红蛋白的结构、性能、用途等。合成了天门冬氨酸Asp、聚乙二醇(PEG)金属离子(Cu)手性衍生物,介绍了衍生物与血红素蛋白质相互作用机理,并由此构筑了氨基酸聚乙二醇金属离子混合吐温80-无机盐-水液-固萃取体系,探讨了氨基酸聚乙二醇金属离子混合吐温80-无机盐-水液-固萃取体系中检测肌红蛋白的方法,并利用此体系进行肌红蛋白的分离纯化。在最佳条件下,体系对马肌红蛋白的一次最大萃取率为98.57%,最大分配系数为2.75;对猪心肌肌红蛋白粗提物的最大萃取率为85.1%,最大分配系数为3.12。
构筑了:①聚乙二醇-天门冬氨酸-铜离子修饰物(简写为PEG-Asp-Cu)混合吐温80-硫酸铵盐-水液-固萃取体系;②聚乙二醇-天门冬氨酸-铜离子修饰物混合吐温80-磷酸钾盐-水液-固萃取体系等两种体系。试验表明,萃取体系中的聚乙二醇修饰物含量、成相聚合物及无机盐的浓度、酸度、萃取温度等条件的变化均能较大地改变肌红蛋白在液固两相中的分配比,通过正交试验,分别得到萃取分离肌红蛋白的最佳条件。
在最佳条件下对肌红蛋白进行正萃后,利用乙二胺四乙酸二钠和调节酸度可将萃至固相的肌红蛋白反萃至盐水相,通过后处理可得到纯度较高的肌红蛋白。