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目的:克隆、表达并纯化弓形虫重组蛋白GRA7,分析其检测弓形虫感染的能力,为弓形虫病诊断提供新的实验依据。方法:(1)根据GenBank中弓形虫GRA7基因序列设计并合成引物,以弓形虫RH株基因组DNA为模版,利用聚合酶链反应(PCR)扩增GRA7基因片段,将目的基因克隆至pMD-18T载体,经过菌落PCR、双酶切和测序鉴定阳性菌落。(2)将序列正确的GRA7基因亚克隆至表达载体pET-28a(+),构建重组质粒pET-28a-GRA7。将pET-28a-GRA7转化E.coliBL21,筛选出阳性