目的:研究极度低氧下人肝细胞癌HepG-2中凋亡抑制蛋白-2(IAP-2)表达的变化,初步探讨其与缺氧诱导因子-1(HIF-1)的相关性。方法:HepG-2细胞株分组孵育:常氧组,体积分数为2%O2+5%CO2+93%N2低氧组4h,95%N2+5%CO2极度低氧组1h,,3h,5h,95%N2+5%CO2极度低氧3h后复氧,另取一组加入300μmol/l氯化钴常氧孵育。用细胞免疫化学定性检测IAP-2蛋白表达;蛋白裂解液提取胞质胞核蛋白,用Western blot检测IAP-2蛋白水平变化,同时对比HIF-1蛋白表达;用RT-PCR检测IAP-2基因水平改变。结果:免疫细胞化学检测IAP-2蛋白在HepG-2细胞中呈阳性表达,定位于胞质。Western blot显示常氧、低氧4h可检测到IAP-2蛋白,表达无差异,极度低氧1h IAP-2蛋白表达明显增加(t=5.723, P<0.05),3h,5h IAP-2持续高表达,各时间段无显著性差异,复氧后恢复基线水平。实验还显示了HIF-1和IAP-2蛋白的表达差异:常氧组HIF-1未表达,低氧4h可诱发,IAP-2保持基线水平;极度低氧HIF-1无变化,IAP-2表达明显增高;复氧后HIF-1不表达,IAP-2恢复基线表达;加入氯化钴后HIF-1恢复表达,IAP-2保持基线,初步表明IAP-2蛋白表达上调有独立于HIF-1的作用机制。RT-PCR检测表明,极度低氧1h IAP-2 mRNA表达明显高于常氧组(t=7.097, P<0.05),3h,5h IAP-2持续高表达,复氧后恢复基线水平。该结果与上述IAP-2蛋白表达上调一致,初步表明IAP-2上调发生在转录水平。结论:极度低氧下IAP-2在人肝细胞癌HepG-2表达上调,并具有独立于HIF-1的抗凋亡机制。