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目的：下丘脑作为能量代谢的调节中枢，能够灵敏感受循环中能量物质的浓度变化而进行反馈性调节。因此本实验选用原代培养的下丘脑弓状核NPY神经元，采用降糖细胞外液灌流，观察降糖对下丘脑弓状核NPY神经元的胞内钙影响。方法：采用免疫细胞化学技术对下丘脑弓状核（ARC）NPY神经元进行鉴定；采用荧光钙离子成像技术记录下丘脑弓状核NPY神经元胞内钙离子水平的变化。结果：当细胞外葡萄糖浓度从10mM降至1mM时，下丘脑ARC-NPY神经元胞内钙F340nm/F380nm比值由0.55±0.04升高到0.73±0.11，上升百分率为28.7±8.5%。结论：降糖灌流液引起下丘脑弓状核NPY神经元胞内钙离子水平升高。目的：下丘脑能根据循环中能量物质的浓度变化而进行反馈性调节。胞外葡糖糖浓度的改变会引起弓状核NPY神经元胞内钙离子浓度的升高，从而使其下游分子钙依赖的CaMKKII等激酶磷酸化，发挥生理效应。但降糖是通过何种机制引起胞内钙升高，目前尚未清楚。因此本实验选用原代培养的下丘脑弓状核NPY神经元，采用降糖灌流液处理，观察降糖引起下丘脑弓状核NPY神经元胞内钙升高的来源。方法：采用荧光钙离子成像技术，对下丘脑弓状核NPY神经元进行胞内钙离子水平记录，用无钙外液和各种工具药，探讨降糖引起细胞内钙离子水平增加的来源。结果：（1）无钙灌流液取消降糖引起的下丘脑弓状核NPY神经元胞内钙离子升高。（2）除特异性P/Q型该通道阻断剂ω-agatoxin TK以外，AMPA受体阻断剂CNQX，NMDA受体阻断剂MK-801和D-APV，L型钙通道阻断剂nifedipine，N型钙通道阻断剂ω-conotoxin GVIA均不能抑制降糖引起的下丘脑弓状核NPY神经元胞内钙离子升高。结论：降糖引起的下丘脑弓状核NPY神经元内钙升高是外钙依赖的机制，并且与P/Q型钙通道开放有关。目的：AMPK是调节摄食和能量代谢的重要分子，而在肝脏等其他组织，AMPK下游分子GSK3β可调节P/Q型钙通道，因此本实验研究AMPK对GSK3β的调节作用是否参与降糖通过P/Q型钙通道引起下丘脑弓状核NPY神经元胞内钙离子升高的作用。方法：对原代培养的下丘脑神经元分别进行以下实验：（1）采用western blot技术检测降糖对AMPK和GSK3β磷酸化的影响；（2）采用荧光钙离子成像技术观察AMPK对GSK3β的调节是否参与降糖引起的下丘脑弓状核NPY神经元的细胞内钙离子升高。结果：（1）降糖引起下丘脑弓状核NPY神经元AMPK和GSK3β磷酸化增加；（2）AMPK激活增加降糖引起的神经元细胞内钙离子升高幅度，该效应可被GSK3β抑制剂模拟。结论：降糖引起下丘脑弓状核NPY神经元AMPK激活和GSK3β抑制，进而通过开放P/Q型钙通道增加下丘脑NPY神经元细胞内钙离子浓度。