黑腹果蝇个体死亡的生物学研究

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当一个多细胞生物死亡时,它作为个体行使功能的时间已经结束,而组成它的细胞们在失去管制的情况下仍将在一段时间内继续活跃着。近年来,已有多方面的文献报道了个体死亡之后的基因表达时序性变化,甚至可以较为精准的通过基因表达变化来预测死亡时间。相较死亡后而言,濒死阶段的基因表达数据更难获得,其中一部分原因是濒死阶段难以界定,因此对于介于生与死之间的个体濒死阶段基因表达还几乎没有报道。在本文中,本实验基于对HIT装置处理后濒死果蝇行为学的大量观察,结合数据分析,定义呈倒地仰卧状态超过20min的果蝇为濒死果蝇。再利用自行搭建的果蝇实时监控摄录装置,收集了濒死、死亡与正常果蝇对照,取果蝇头部进行了共3组,每组3个生物学重复的lncRNA测序。测序结果显示,濒死阶段的果蝇应激响应、细胞增殖分化等相关的基因较之死亡与正常果蝇有差异性的表达。神经系统对动物生理活动起着重要的调控作用。根据中国全国第三次居民死因调查结果,中枢神经系统疾病排在所有死因第一位。果蝇是重要的神经生物学研究模式生物,已经已经被用来构建多种中枢神经系统疾病模型。但是果蝇中枢神经系统对果蝇基础生命活动的调控作用尚不明确。在本研究中,我采用温度遗传学手段人工激活成蝇大脑中的大多数神经元(Elav-Gal4>UAS-TrpA1或ChaT-Gal4>UAS-TrpA1),结果发现持续激活6h时就足以导致果蝇不可逆转的死亡,这说明果蝇神经系统的正常功能与果蝇的存活有关,黑腹果蝇中枢神经系统对基础生理过程很可能起着进化上保守的重要调控作用。为了找到果蝇大脑控制基础生命活动的相关脑区,本实验利用类似的温度遗传学策略,人工激活或阻断神经元活性,筛选了576个主要标记中枢神经系统的Gal4品系。筛选结果发现了29个品系,经持续48h的阻断或激活可导致高于80%的死亡率;其中的16个品系,持续激活48h导致100%的死亡率。此外,对死亡率和神经元持续阻断或激活的时长分析表明12h是一个死亡率陡增的节点,在上述29个品系中只有9个品系的12h处理死亡率是高于80%的。
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