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目的:研究葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基因在人乳腺癌细胞株MCF-7和人耐多柔比星乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中的表达及意义;探讨GCS与P-糖蛋白表达水平以及功能之间的关系。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测多柔比星对MCF-7/ADR、MCF-7的抑制率和IC50,用浓度为5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L的GCS抑制剂D,L-threo-1-phenyl-2-decanoyl-amino-3-morpholino-1 -propanol (PDMP)预处理MCF-7/ADR 24h、48h后检测多柔比星对其抑制率和IC50;运用流式细胞检测术(FCM)检测MCF-7及PDMP处理前后MCF-7/ADR细胞中P-gp、GCS蛋白的表达水平;运用FCM检测不同浓度的PDMP预处理MCF-7/ADR 48h后,细胞内多柔比星的潴留量并拍摄荧光照片;应用实时荧光定量逆转录多聚酶链反应(Real time RT-PCR)检测MCF-7以及PDMP作用前后MCF-7/ADR细胞中GCS mRNA的表达水平。结果:MCF-7/ADR对MCF-7的耐药倍数为22.69倍,PDMP预处理后多柔比星对MCF-7/ADR的抑制率升高,IC50下降(P<0.05);MCF-7/ADR中GCS和P-gp的表达水平均高于MCF-7(P<0.001),PDMP使MCF-7/ADR中GCS蛋白和mRNA表达水平均下降(P<0.05),对P-gp蛋白表达水平无明显影响(P>0.05)。FCM定量检测及荧光照片定性检测显示,不同浓度的PDMP预处理MCF-7/ADR 48h后,可使多柔比星在其内潴留量不同程度增多。结论:GCS可能参与恶性肿瘤耐药的发生过程,并在MCF-7/ADR多药耐药中起重要作用,在多药耐药表型中GCS与P-gp有一定关系;PDMP不影响P-gp蛋白的表达水平,但能影响其功能,PDMP能比较有效的逆转人耐多柔比星乳腺癌细胞株MCF-7/ADR对多柔比星的耐药性。