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该论文研究了α-1,6FucT靶向性RNA干扰后肺癌细胞的生物学行为的变化以及E-钙粘蛋白核心岩藻糖基化的表达与意义,并初步揭示了α-1,6FucT的激素调控.该论文通过转染α-1,6FucT靶向性的RNA干扰表达载体引发α-1,6FucT基因(FUT8)沉默,采用免疫细胞化学法、免疫荧光染色、流式细胞计数和凝集素印迹检测RNA干扰后肺癌细胞内糖蛋白糖链核心岩藻糖基化水平的变化以鉴定RNA干扰的效果.并且以此为基础,通过研究RNA干扰对肺癌细胞生物学行为的改变,进一步阐明α-1,6FucT在肿瘤的发生发展和转移过程中所起到的生物学功能.通过免疫沉淀和蛋白质印迹的结果表明,在低转移肺癌细胞中不存在核心岩藻糖基化E-钙粘蛋白,而在高转移肺癌细胞中呈现明显的核心岩藻糖基化E-钙粘蛋白的表达,不仅首次表明E-钙粘蛋白可作为α-1,6FucT的底物,而且提示核心岩藻糖基化E-钙粘蛋白可能与肺癌转移有关.α-1,6FucT靶向性RNA干扰后E-钙粘蛋白核心岩藻糖基化水平明显减少,同时E-钙粘蛋白所介导的细胞间聚集明显上调,表明E-钙粘蛋白的核心岩藻糖基化修饰能负性调控E-钙粘蛋白的功能.为佐证RNA干扰的结果,我们应用α-1,6FucT表达载体转染肺癌细胞后对E-钙粘蛋白核心岩藻糖基化水平和细胞间聚集进行了检测.为了阐明核心岩藻糖基化修饰负性调控E-钙粘蛋白功能的分子机制,我们对RNA干扰后的肺癌细胞中的E-钙粘蛋白表达水平进行了蛋白质印迹分析.但是,干扰后E-钙粘蛋白的表达水平与对照相比并无变化.因而我们对E-钙粘蛋白分子的核心岩藻糖基化进行了分子模拟.为探讨核心岩藻糖基化E-钙粘蛋白的生物学意义,我们分析了核心岩藻糖基化E-钙粘蛋白在不同组织来源的肿瘤细胞株中的表达情况,初步揭示出核心岩藻糖基化E-钙粘蛋白在不同组织来源的肿瘤(肝癌、肺癌、胃癌、宫颈癌、卵巢癌和乳腺癌)中存在差异性表达.为了进一步阐明核心岩藻糖基化E-钙粘蛋白的临床应用价值,我们对具有不同预后的肺癌病人的肿瘤组织标本进行了核心岩藻糖基化E-钙粘蛋白的表达检测,通过分析核心岩藻糖基化E-钙粘蛋白的表达情况与相应肺癌病人的临床病理学背景的相关性,我们揭示出核心岩藻糖基化E-钙粘蛋白的表达与肺癌病人的预后呈显著相关,具有作为肺癌病人临床预后标志物的重要价值.通过对肝癌细胞株SMMC-7721激素处理后的半定量RT-PCR和LCA凝集素印迹分析,我们证实雌激素能明显上调FUT8基因的转录,并显著提高135 KD、100 KD和60 KD底物蛋白的核心岩藻糖基化水平,同时改善了细胞的生长状态;而孕激素则可以明显下调FUT8基因的转录,并显著降低135 KD、115 KD、100 KD和60 KD底物蛋白的核心岩藻糖基化水平,同时改变了细胞的正常形态.由此,我们从而可以推测雌孕激素能通过对α-1,6FucT表达的调节参与肿瘤的发生发展和转移过程.综上所述,α-1,6FucT能促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移,而且作为其催化产物之一的核心岩藻糖基化E-钙粘蛋白与肿瘤转移及病人预后高度相关.此外,肿瘤细胞中α-1,6FucT的表达可受雌孕激素调控,从而参与激素介导的肿瘤恶性行为的形成过程.