菝葜提取物抗卵巢癌的多重效应及其分子机制

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目的:研究菝葜提取物抗卵巢癌细胞的作用,并从细胞水平和分子水平讨探其发挥该作用的机制。方法:用菝葜提取物对卵巢癌细胞进行干预。首先,采用CCK-8,EdU法以及克隆形成实验对细胞的活性、增殖、克隆形成、以及提取物与传统药物联用后的化疗效应进行考察;接着,分别采用IP单染法和Annexin V-FITC/PI双染法,经流式细胞术检测药物处理后细胞的周期比例和细胞的凋亡特征;然后,通过Transwell小室法考察药物处理后细胞的迁移能力;最后,对NF-κB及多种蛋白的表达水平进行了Western blot分析,并用免疫荧光染色法观察NF-κB在细胞中的定位。结果:菝葜正丁醇提取物可有效抑制卵巢癌细胞的活性、增殖能力和克隆形成能力,抑制作用呈浓度依赖性,并且,该提取物对传统化疗药物顺铂和阿霉素具有增敏作用。流式细胞术分析显示,菝葜正丁醇提取物将A2780细胞周期阻滞在G2/M期并诱导细胞凋亡。细胞迁移实验显示菝葜正丁醇提取物干预后,细胞的迁移能力减弱。Western blot分析发现,药物可能通过抑制AKT的活性阻滞NF-κB的核转录,从而使NF-κB的活性受到抑制,进而抑制其下游因子Bcl-2,Bcl-xL,XIAP,cIAP-1,ICAM-1,VEGF和Cyclin D1。实验结果还显示菝葜正丁醇提取物可活化Capase-3、PARP和Bax因子。结论:上述实验结果表明,菝葜正丁醇提取物在体外可从多方面发挥抗卵巢癌的作用,抑制NF-κB的活性可能是其抗卵巢癌作用的分子机制之一,这为进一步研究菝葜抗卵巢癌的作用打下了理论基础。
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