氟苯尼考对肉鸡肝脏和免疫功能的损伤及丹参多糖保护效果的研究

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近年来,有关氟苯尼考对猪、羊、马等家畜毒性作用的研究较多,而有关其对肉鸡的毒性作用却鲜有报道。目前,氟苯尼考在肉鸡养殖过程中被广泛使用,甚至还存在大量滥用现象,不仅导致药物在肉鸡体内大量残留,还会损伤肉鸡机体造成疾病多发。为探讨氟苯尼考对肉鸡肝脏和免疫功能的损伤以及丹参多糖对其的缓解效果,特进行了如下试验研究。1.氟苯尼考(FFC)早期给药对肉鸡生长发育及肝脏功能的影响:360只1日龄肉鸡被随机分成6组,其中,1组为对照组,2-6组为试验组。试验组分别在饮水中连用 5d 添加不同剂量(0.15 g/L、0.3 g/L、0.6 g/L、1.2 g/L、1.8 g/L)的 FFC。各组分别于6日龄、21日龄和42日龄时各随机选取20只翅下静脉采血,并摘取肝脏,检测相关指标。结果显示,与对照组相比,6日龄、21日龄和42日龄时,各试验组肉鸡的增重均显著降低(P<0.05);在6日龄和21日龄时,各试验组组肉鸡血清中ALT、AST的活性均显著升高(P<0.05),TP和ALB的含量显著降低(P<0.05);到42日龄时,各组之间AST和ALT的活性均无显著差异(P>0.05);但当FFC添加剂量大于0.6g/L时,各试验组肉鸡血清中TP和ALB的含量显著降低(P<0.05)。6和21日龄时,各个FFC试验组肉鸡的血清MDA含量显著升高(P<0.05),肝组织中肝药酶及其mRNA的转录均显著降低(P<0.05);42日龄时,只有1.2g/L和1.8g/L FFC试验组肉鸡血清的MDA含量仍显著高于对照组(P<0.05)。6日龄时,各试验组肉鸡血清GSH和CAT的含量和抗氧化蛋白Nrf2、HO-1和NQO-1的mRNA转录水平及蛋白表达均显著降低(P<0.05);而肝细胞凋亡率以及凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-6 mRNA转录水平和蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05)。21和42日龄时,添加量高于0.6g/L的FFC试验组肉鸡的血清GSH和CAT含量以及抗氧化蛋白Nrf2、HO-1和NQO-1的mRNA转录水平显著降低(P<0.05)。结论:即使临床推荐剂量(0.15 g/L)的氟苯尼考也可显著减缓肉鸡的生长发育,损伤其肝脏,影响肝功能;氟苯尼考对肉鸡肝脏的损伤作用可能是通过抑制Nrf2-ARE通路上蛋白活性,增加肝脏氧化应激来介导的。2.丹参多糖(SMPs)对氟苯尼考(FFC)导致肉鸡肝脏的损伤的保护作用:将360只1日龄的肉鸡随机分成6组,FFC对照组和SMPs试验组均应用0.15g/L氟苯尼考连续5天饮水。SMPs低、中、高试验组分别同时给予1.25g/L、2.5g/L和5g/L的丹参多糖进行饮水。各组于6日龄,21日龄和42日龄各组随机选取20只进翅下静脉采血,摘取肝脏,检测相关指标。结果显示,在6 日龄、21日龄时和42日龄时,与空白组相比,FFC组的肉鸡增重、肝组织中CYP1A1的表达、肝组织中 Nrf2和GSTT1 mRNA的转录水平显著下降(P<0.05),肝组织中MDA含量均显著升高(P<0.05);而与FFC组相比,SMPs各剂量组肉鸡的增重、肝组织中Nrf2和GSTT1 mRNA的转录水平显著升高(P<0.05),肝指数和肝组织中MDA含量显著下降(P<0.05)。而在6日龄和21日龄时,与空白对照组相比,FFC组肉鸡血清中AST和ALT的含量以及肝脏细胞凋亡率和凋亡相关因子P53、CytC和Caspase-3的mRNA转录和蛋白表达显著升高(P<0.05),血清中TP的含量、肝组织中SOD和CAT的含量、肝组织中CYP1A1、CYP2H1、UGT2A1、HO-1和NQO-1mRNA或蛋白的表达显著降低(P<0.05)。而到42日龄,以上指标表达在FFC组与空白组之间不再存在差异(P>0.05)。在6日龄和21日龄时,与FFC组相比,SMPs组肉鸡血清中AST和ALT的含量以及肝脏细胞凋亡率和凋亡相关因子P53、CytC和Caspase-3的mRNA转录和蛋白表达显著降低(P<0.05),血清中TP的含量、肝组织中SOD和CAT的含量以及CYP1A1、CYP2H1、UGT2A1、HO-1和NQO-1 mRNA或蛋白的表达显著升高(P<0.05)。而到42日龄,以上指标表达在FFC组与SMPs组之间也不再存在差异(P>0.05)。此外,在各个时间段,SMPs对照组与空白对照组之间各指标均无显著差异(P>0.05)。结论:SMPs可通过调节Nrf2通路相关蛋白,抑制肝细胞氧化应激,从而减少肝细胞凋亡,保护FFC诱导的肉鸡肝损伤,其中5g/L的SMPs效果最佳。3.丹参多糖(SMPs)对氟苯尼考(FFC)导致的肉鸡免疫功能的保护作用:选用1日龄雏鸡900只,分为6组。分组及处理与试验2相同,并检测相关指标。结果显示,6日龄时,与空白组相比,FFC组肉鸡全血中白细胞亚型的数量、血清中免疫球蛋白IgM和IgG的含量以及细胞因子IL-2、IL-4和IFN-γ的含量显著降低(P<0.05);到21和42日龄时,FFC组的各指标均与空白组没有显著差异(P>0.05)。6日龄时,2.5g/L和5g/L SMPs组肉鸡全血中Mon和WBC的数量、血清中免疫球蛋白IgM和IgG的含量以及细胞因子IL-2、IL-4和IFN-y的含量显著高于FFC组(P<0.05),到21和42日龄时,2.5g/L和5g/L的SMPs组肉鸡血液中白细胞数量、新城疫(ND)和禽流感(AI)抗体的滴度、血清中免疫球蛋白(IgA、IgG和IgM)的含量和细胞因子(IL-2、IL-4和IFN-γ)的含量显著高于空白对照组和FFC组(P<0.05)。5g/L SMPs组肉鸡外周血淋巴细胞转化率也显著高于空白对照组和FFC组(P<0.05)。结论:FFC对幼龄肉鸡的免疫功能有损伤作用,而随着肉鸡日龄增加,FFC对肉鸡免疫功能的损伤得到恢复;而SMPs能够有效缓解FFC对肉鸡的免疫功能的损伤,而随尤以5g/L的剂量的SMPs提高肉鸡的免疫功能的效果最佳。
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