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骨肉瘤是最常见的恶性骨肿瘤之一，好发于青少年，具有早期转移和侵袭能力强的特点，致残致死率相当高；其昂贵的治疗费用、痛苦的化疗给患者及家人带来很大影响。对骨肉瘤的早期诊断和治疗到目前为止还缺乏有效的措施，骨肉瘤的发病原因和发病机制仍是未知的难题。因此，研究骨肉瘤的发病原因和机制，探寻诊断和治疗骨肉瘤的有效途径，已成为现阶段骨肉瘤研究领域的主要方向之一。骨肉瘤的发生发展是一个多因素、多基因作用的复杂调节过程。近年来，有关细胞信号转导与骨肉瘤发生的关系成为肿瘤研究的热点，WNT信号转导途径的异常改变在许多肿瘤中显示出重要意义。WNT信号通路是一个复杂的蛋白质作用网络，参与成年动物的正常生理过程，同时也参与调节动物的胚胎发育、组织稳态及癌变等多个方面。WNT6基因是WNT家族中的重要成员，本课题组前期实验发现WNT6在高转移潜能骨肉瘤细胞系F5M2中和低转移潜能骨肉瘤细胞系F4中差异表达明显，这提示WNT6可能参与调控骨肉瘤的发生、发展、转移等生物学行为。目的：本研究通过观察WNT6在骨肉瘤组织中的表达，探讨其临床意义；通过siRNA抑制WNT6基因的表达，探讨其对骨肉瘤细胞增殖及侵袭能力的影响。为以WNT6为指标对原发性骨肉瘤的诊断和以WNT6为靶点进行原发性骨肉瘤生物学治疗提供理论依据。方法：1、收集骨肉瘤、骨样骨瘤和骨软骨瘤临床样本，应用SP免疫组织化学染色法分别检测各组织中WNT6蛋白的表达情况，并分析其与骨肉瘤临床病理参数及预后的关系。2、以RNAi技术抑制MG63细胞和F5M2细胞中WNT6基因的表达，应用FAM-siRNA和Western-blot检测转染效率和转染WNT6-siRNA后骨肉瘤细胞中WNT6蛋白的表达情况。3、应用MTT法和Transwell法检测抑制WNT6表达对骨肉瘤细胞增殖和侵袭能力影响。结果：1、WNT6在原发性骨肉瘤组织中阳性表达，明显高于骨样骨瘤和骨软骨瘤组织；WNT6的表达与年龄、肿瘤最大径、肺转移等密切相关，与3年生存率负相关；复发转移组WNT6阳性表达明显高于未复发转移组。2、成功转染WNT6-siRNA后，两株骨肉瘤细胞的WNT6蛋白表达水平均明显降低。3、MTT实验结果显示：抑制WNT6基因表达后两株骨肉瘤细胞的增殖均明显减弱；Transwell实验结果显示，抑制WNT6基因表达后两株骨肉瘤细胞的侵袭能力均明显减弱。结论：WNT6在原发性骨肉瘤中的表达明显上调，WNT6表达与骨肉瘤的肺转移、生存率等相关，siRNA抑制WNT6的表达能有效抑制人骨肉瘤细胞的增殖和侵袭能力，提示WNT6可能在骨肉瘤的发生、发展以及预后方面均产生影响。WNT6在临床可能成为一个诊断原发性骨肉瘤的检测指标，并可能为骨肉瘤基因治疗的临床应用提供理论依据。