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目的:目前Q开关1064nm掺钕钇铝石榴石激光(Nd:YAG)常用于治疗咖啡斑、日晒斑、雀斑、黄褐斑、太田痣等皮肤色素沉着性疾病。临床工作中观察到外用含表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)凝胶对激光治疗色素沉着有一定的疗效,但是具体机制却少见报道。本实验采用Q开关1064nm掺钕钇铝石榴石激光(Nd:YAG)联合局部外用含表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)凝胶对窄谱紫外线(NB-UVB)所致的花色豚鼠背部棕黄色区皮肤色素沉着进行治疗,探究QS1064nmNd:YAG激光治疗联合外用含表皮生长因子凝胶对UVB诱导豚鼠皮肤色素沉着的抑制作用。方法:选择健康花色豚鼠10只(清洁级),雌性,体重200~250g,年龄1~2个月,豚鼠背部棕黄色毛发区域脱毛,暴露皮肤。以窄谱紫外线(narrow band ultraviolet,NB-UVB)照射,照射前要调整焦距,使两红色指示灯重合,照射的剂量根据预实验结果的最小红斑量(minimal erythema dose,MED),即900mJ/cm2。每周1次,共照射3次,总剂量2700mJ/cm2。模型建立成功后,将造模区皮肤分为3组,以每只豚鼠头部朝向为上方,从左到右分为A、B、C三组,分别进行不同处理。A组:中间区域为空白对照组A,造模成功后不做任何处理。B组:左侧区域为安慰剂组B:Q开关1064nmNd:YAG激光照射,光斑直径4 mm,能量密度2.0 J/cm2,扫描一遍,激光治疗后立即将不含EGF的安慰剂凝胶均匀涂抹于B组区域,厚度约2mm,每日一次,连续10天。C组:右侧区域为实验组C:Q开关1064nmNd:YAG联合EGF凝胶治疗:Q开关1064nmNd:YAG激光照射,光斑直径4 mm,能量密度2.0 J/cm2,扫描一遍,激光治疗后立即将含EGF凝胶均匀涂抹于C组区域,厚度约2mm,每日一次,连续10天。分别于造模前、造模后与各组Q开关1064nmNd:YAG激光照射后的2周、4周分别采用拍照大体评估色素沉着并取材制作病理切片,病理切片分别进行黑素颗粒染色(Fontana-Masson银染法)及干细胞因子受体(c-kit)免疫组织化学染色。观察表皮色沉、黑素颗粒合成变化以及c-kit蛋白表达情况,以探究QS1064nmNd:YAG治疗联合外用含EGF凝胶对UVB诱导豚鼠皮肤色素沉着的抑制作用。结果:1.肉眼观察皮肤色素沉着变化NB-UVB照射完成后,豚鼠背部照射区皮肤颜色显著变深,色素沉着分布均匀、稳定。A组:未治疗组:治疗后2周、4周观察A组皮肤颜色略有减退,但较正常皮肤组织仍可见较多色素沉着。B组:安慰剂组:治疗后2周、4周观察皮肤颜色较造模后色素沉着明显减少,第4周时与正常皮肤组织颜色相比较,差异不明显。C组:EGF实验组:治疗后2周、4周观察皮肤颜色较造模后皮肤色素沉着明显减退,第4周时与正常皮肤颜色相比较,未见明显差异。2.黑素颗粒改变Fontana-Masson银染法可见NB-UVB照射后豚鼠皮肤组织黑色颗粒含量显著增加,且造模前后黑色素颗粒含量差异有统计学意义(P<0.001)。治疗后第2周与第4周B组和C组黑色素颗粒含量均明显低于同期A组含量,且差异具有统计学意义(P<0.001)。治疗后2周时C组黑色素颗粒含量略低于B组,但差异无统计学意义(P>0.05)。第4周C组黑色素颗粒含量低于B组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。对治疗后第2周和第4周各组内不同时间皮肤黑色素颗粒含量进行比较,组内和组间差异都具有统计学意义(P<0.001)。时间和区组因素间存在交互作用。3.c-kit蛋白表达水平变化NB-UVB照射后豚鼠皮肤c-kit表达强度明显增强,表达量显著增加,造模前后c-kit表达量差异具有统计学意义(P<0.001)。治疗后第2周与第4周B组和C组c-kit表达均明显低于同期A组含量,且差异具有统计学意义(P<0.001)。治疗后2周时C组c-kit表达略低于B组,但差异无统计学意义(P>0.05)。第4周C组c-kit表达低于B组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.证实了QS1064nmNd:YAG对UVB诱导的豚鼠皮肤色素沉着有确切疗效;2.外用含表皮生长因子凝胶可以提高QS1064nmNd:YAG激光治疗UVB诱导豚鼠皮肤色素沉着的疗效;3.外用含重组人表皮生长因子凝胶降低皮肤色素沉着的机制可能与降低Q开关1064nmNd:YAG治疗后豚鼠皮肤c-kit的表达进而抑制黑素细胞的成熟及黑色素颗粒的合成有关。