广西产地钱原植物鉴别及药效实验研究

来源 :广西中医学院 广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gtlclx001
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目的:对广西产地钱进行产地调查,并对3种广西产地钱的原植物进行鉴别;探讨拳卷地钱总黄酮对小鼠急性肝损伤的保护作用,并研究其在乙型肝炎病毒(HBV)基因转染的人肝癌细胞系2.2.15细胞培养中,对细胞的毒性及其分泌的表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)的抑制作用。方法:(1)对广西产地钱进行产地调查,样品采集;观察3种广西地钱的原植物形态,并对其孢芽杯进行鉴别。(2)采用四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的模型,观察拳卷地钱总黄酮对小鼠肝功能指标ALT(丙氨酸转胺基酶)和AST(天门冬胺酸转胺基酶)水平的影响。(3)药物对细胞的毒性实验:在接种2.2.15细胞后24小时,加2倍稀释的5个稀释度药液浓度500、250、125、62.5、31.3μg·ml-1,4天换一次药液,维持8天,用显微镜观察细胞病变;(4)药效学实验:在无毒浓度下,以2倍稀释药液稀释为62.5、31.25、15.62、7.81、3.9μg·ml-15个浓度,37℃5%CO2培养,每4天收集培养液,换原浓度药液培养,并于第8天时收集培养液,同时测定HBsAg和HBeAg。结果:(1)初步整理出广西产地钱的种类、分布和生境特征;3种广西地钱的原植物形态及孢芽杯的性状与显微鉴别,显示了种类之间的差异。(2)拳卷地钱总黄酮有效地抑制四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的血清ALT和AST升高。(3)细胞毒实验结果表明,拳卷地钱总黄酮对细胞的半数细胞毒浓度(TC50)为152.37μg·ml-1,最大无毒浓度(TC0)为31.3μg·ml-1。(4)药效学实验:在最大无毒浓度对细胞分泌的HBsAg的抑制率为(60.04±1.704)%,半数有效剂量(IC50)为27.693μg·ml-1;对细胞分泌的HBeAg的抑制率为(52.62±0.933)%,IC50为38.695μg·ml-1。与空白对照组比较有显著性差异。结论:利用原植物形态检索及孢芽杯的异同,可有效地鉴别广西产地钱的种类;拳卷地钱总黄酮具有保肝降酶及抗乙型肝炎病毒作用。
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