根据之前的文献研究我们得知,在自身免疫性肝炎患者的浆母细胞（Plasmablasts,PBs）中,转录因子T-bet的表达水平升高,且与自身免疫性肝炎进展有关。本文就关于自身免疫性肝炎患者中影响T-bet的表达以及T-bet+PBs数量的调控因素进行探究。对于揭示转录因子T-bet的功能以及其在自身免疫性肝炎中可能的作用机制提供新思路,并且丰富与自身免疫性肝炎相关致病机制的研究内容。我们通过AIH患者全血分离纯化得到的外周血B细胞作为为直接研究对象。对16例35-67岁女性AIH-1患者和25例健康受试者签署书面知情同意书后采集外周血样本。首先,通过采取人外周静脉血,分离纯化所得的单个核细胞作为主要的实验细胞即直接来自于AIH患者和健康受试者的PBMC。其次,通过体外细胞交叉孵育实验、体外刺激和中和实验、Luminex分析技术以及流式细胞仪等多种方法进行探究。最后,使用Prism软件（GraphPad Prism）,采用配对或未配对t检验对数据进行分析。我们分离了来自5名AIH患者和健康受试者的外周血B细胞和血清,然后双方血清交叉培养对方B细胞。亚群分析表明,AIH患者血清诱导健康人来源的B细胞中形成较高比例的PBs,而健康人的血清对AIH患者的PBs没有影响。同时,暴露于AIH患者血清后,只T-bet+PBs细胞的占比出现升高,na?ve B细胞、移行B细胞和记忆B细胞无此变化。为了揭示血清中的有效成分,我们用Luminex技术定量了各种细胞因子的水平。与健康受试者相比,检测到AIH患者血清中含有更多的IL-6、IL-10、IL-17A、IL-21和IL-23,但IL-2、IL-4和TNF-α含量相当。值得大家注意的是,其IFN-γ水平与其他自身免疫性疾病有所不同,即其在涉及的8名AIH患者中仅轻度升高。进一步通过利用重组蛋白受体阻断实验验证可得,阻断IL-21和IL-23而非IL-6、IL-10和IL-17,可以抑制T-bet的表达和PBs的分化。然而体外IL-21和IL-23刺激并不能提高B细胞的PB百分率和T-bet的表达水平。考虑到细胞因子只在被 Toll 样受体-7（Toll-Like Receptor-7,TLR-7）或 Toll 样受体-9（Toll-Like Receptor-9,TLR-9）配体预先激活的B细胞中诱导T-bet,我们测量了 AIH患者的TLR-7和TLR-9的表达。实验证明,与T-bet-PBs相比,在T-bet+PBs中,TLR-9表达升高,而TLR-7无此改变。因此,我们制备了由IL-21、IL-23和TLR-9激动剂-CpG（3-signals）组成的体外刺激方案,其结果是在3-signals刺激下,PBs在B细胞中的占比增加,T-bet表达水平升高。总之,这些数据表明AIH患者的血清成分与健康受试者不同。AIH患者血清IL-21和IL-23通过TLR-9,可诱导循环PBs的分化,增强了 AIH患者中的T-bet表达。这提示T-bet可能参与自身免疫性肝炎的致病过程,为自身免疫性肝炎致病机制的研究提供新方向,为未来临床上创新的治疗策略提供了理论基础。