法舒地尔通过调节NLRP3炎性体保护小鼠克雷伯杆菌肺炎

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研究目的:本研究致力于探索NLRP3炎性体这个研究甚多的炎性体分子复合物和在体内有着广泛作用的RhoA/ROCK信号系统的具体关系,研究临床使用的ROCK抑制剂—法舒地尔(Fasudil)对于肺炎克雷伯杆菌引起的炎性体活化作用,并探究其机制。本研究旨在探讨宿主面对细菌感染免疫反应的深层机制,挖掘未知的潜在影响感染性疾病预后的因素,丰富感染性疾病的发生发展和机制的理论基础,并探寻潜在的治疗靶点。研究方法:体外采用野生型小鼠的骨髓来源巨噬细胞(BMDM),模拟巨噬细胞在面对克雷伯杆菌的入侵的情景,通过法舒地尔药物干预,通过WB、qPCR等方法检测细胞NLRP3炎性体的激活及其下游产物生成情况。体内实验通过H&E染色、WB、ELISA、qPCR等手段,观察不同药物组炎症小鼠模型肺组织、血清、肺泡灌洗液(BALF)中的NLRP3炎性体及其下游产物的水平,探究法舒地尔究竟如何影响NLRP3炎性体。观察法舒地尔是否对罹患肺炎的小鼠具有改善预后的功能。研究结果:①法舒地尔对肺炎克雷伯杆菌所致的小鼠肺炎模型有保护作用;②法舒地尔减轻小鼠克雷伯杆菌肺炎的肺组织损伤;③法舒地尔可降低BALF IL-1 β水Ⅱ平并减轻肺炎症渗出;④法舒地尔抑制骨髓来源巨噬细胞NLRP3炎性体的活化;⑤法舒地尔减轻在小鼠肺炎模型中肺泡巨噬细胞炎性体的表达水平。研究结论:体外研究证实,肺炎克雷伯杆菌的确激活了 BMDM的炎性体,而法舒地尔可使这种激活减弱。与体外实验一致,法舒地尔确实能保护小鼠减少克雷伯杆菌肺炎的死亡率和肺损伤,降低其炎症因子水平。
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