云连总生物碱提取工艺及云连总生物碱对小鼠焦虑行为的影响

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目的:通过正交实验设计研究云连总生物碱最佳提取方法;观察云连总生物碱对小鼠焦虑行为的影响,并探讨其抗焦虑作用机制。方法:1.云连总生物碱提取工艺优选:采用L9(34)正交表,以云连总生物碱的含量为评价指标,观察乙醇浓度(A)、乙醇用量(B)、提取时间(C)和提取次数(D)四种因素对云连总生物碱提取工艺的影响,优选出云连总生物碱的最佳提取工艺;2.行为学实验:雄性小鼠,以不同剂量的云连总生物碱浸膏混悬液,连续灌胃6d,然后利用小鼠高架十字迷宫装置、明暗箱装置观察云连总生物碱总对小鼠焦虑行为的影响。行为学实验结束后立即取小鼠全脑,并采用酶联免疫法测定小鼠脑内γ-氨基丁酸、谷氨酸和5-羟色胺递质含量。结果:1.影响云连提取效果的因素顺序为乙醇浓度>提取时间>乙醇用量>提取次数;云连总生物碱最佳提取工艺为用8倍量80%的乙醇溶液回流提取3次,提取时间每次1h。2.云连总生物碱中剂量组在小鼠高架十字迷宫模型上表现出抗焦虑作用,其作用效果与地西泮组比较无显著性差异。云连总生物碱中剂量给药组能显著升高小鼠脑内GABA的含量,与地西泮组比较无显著性差异;云连总生物碱高、中剂量组有降低脑内Glu含量的趋势,云连总生物碱各组有降低脑内5-HT含量的趋势。结论:1.云连总生物碱最佳提取工艺为用8倍量80%的乙醇溶液回流提取3次,提取时间每次1h,所得云连浸膏中生物碱经纯化后以小檗碱、表小檗碱、黄连碱、药根碱和巴马汀计,黄连总生物碱含量可达55%以上。2.云连生物碱具有明显的抗焦虑作用,其抗焦虑机制与升高小鼠脑内GABA含量有关;可能与降低脑内5-HT和Glu的含量有关。
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