羟喜树碱通过TGF-β诱导的PI3K/AKT通路抑制鼻咽癌进展的机制研究

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背景鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)是一种恶性程度极高的肿瘤。临床观察和基础研究表明NPC的致病因素有很多,如遗传因素、病毒感染和环境影响等。尽管以前有报道多种抗肿瘤药物如docetaxel、Cisplatin、fluorouracil和gemcitabine等可用于NPC治疗,但对于晚期多重耐药肿瘤疗效不尽如人意。因此,寻找新的有效的抗肿瘤药物以及探究NPC侵袭和转移的分子机制对NPC的治疗具有重要意义。羟喜树碱(Camptothecin,CPT)作为一种抗肿瘤药物被广泛应用于消化道肿瘤和头颈癌治疗,最近几年越来越多的研究将CPT作为治疗肿瘤的重要潜在药物。一个研究表明CPT能够通过下调MAPKP-1和激活ERK1/2来诱导结直肠癌细胞的凋亡。同时,Sun等研究证明CPT 能够通过 PI3K/AKT、αVβ3/αVβ5 以及 matrix metalloproteinases(MMP)-2/-9通路抑制前列腺癌细胞的生长和转移。此外,药代动力学研究表明CPT偶联纳米颗粒CRLX101能够有效治疗人类肿瘤。尽管CPT治疗实体瘤取得了巨大的进展,但是关于CPT治疗NPC的报道却极少,关于CPT对NPC细胞影响的分子机制也不清楚。目的本研究主要是观察CPT对NPC肿瘤生长的影响,探究CPT对NPC肿瘤影响的分子机制,从而为CPT治疗NPC提供新的理论基础和方向。方法用不同浓度CPT处理NPC细胞系,观察CPT对NPC细胞系的增殖和细胞周期的影响;用不同浓度CPT处理NPC细胞系,观察CPT对NPC细胞系侵袭和转移能力的影响;利用qPCR、WB和免疫组化等手段探究CPT对NPC细胞系及肿瘤组织中PI3K/AKT信号通路的影响;利用裸鼠移植瘤模型体内证明CPT对NPC肿瘤生长及小鼠生存时间的影响。结果(1)CPT能够抑制NPC细胞系HK1和C666-1的生长,导致细胞周期的阻滞。(2)CPT能够抑制NPC细胞的侵袭和转移。随后我们对CPT对NPC细胞系恶性侵袭能力的影响进行了探究。(3)CPT通过调控TGF-β诱导的PI3K/AKT通路调控NPC细胞的生长。(4)CPT能够抑制肿瘤的生长,延长小鼠的生存时间。结论我们通过体外实验证明CPT能够明显抑制NPC细胞系的增殖,将细胞周期阻滞在S期,能够抑制肿瘤细胞系的侵袭和转移,同时我们还发现了 CPT主要是通过TGF-β诱导的PI3K/AKT通路对NPC细胞系产生抑制。此外,我们通过体内实验证明CPT能够明显抑制NPC肿瘤的生长,抑制肿瘤组织的PI3K/AKT通路。总之,本研究探究了 CPT抑制NPC肿瘤的分子机制,强化了CPT的抗肿瘤功效,为临床上CPT治疗NPC提供了理论基础,也为NPC的治疗提供了新的发展方向。
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