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研究背景:关于“衰老”的机制目前有多种假说,其中得到较多认可的是自由基假说。此假说认为活性氧/氮自由基(ROS,reactive oxygen/nitrogen species)持续作用使机体发生氧化损伤是导致生理功能减退的主要原因。谷胱甘肽、超氧化物歧化酶等抗氧化剂在生理条件下都发挥清除自由基的作用。GSH/GSSG被认为是机体内最主要的氧化还原缓冲配对。SOD是唯一能够特异性清除O2-自由基的抗氧化酶。然而并不是机体清除自由基的能力越强则越健康,这是由于很多重要物质的产生和合成都需要氧自由基的参加。对GSH、SOD等化合物正常值范围的分析有助与评价机体氧化还原状态。口腔健康状况往往与全身健康状况相关,如糖尿病等疾病。唾液是一种安全无创且较易获得的体液。目的:研究全血中GSH于NEM的衍生化反应条件。检测健康成人唾液和全血中GSH、GSSG含量和GSH/GSSG比值的增龄性变化,以及唾液和全血中以上化合物的相关性。分析健康成人唾液与血浆中SOD抑制率的增龄性变化,以及唾液和血浆SOD抑制率的相关性。以期通过唾液中相关物质的研究评价机体的全身状态。方法:根据纳入排除标准随机选取2016年4月至2016年10月于解放军总医院健康管理研究院国宾部体检中心年龄20～79岁体检的志愿者203名,根据年龄将受试人群分为青年组(20-44岁),中年组(45-59岁),老年组(60-79岁);并对性别进行分组。研究全血中GSH与NEM的完全衍生化条件。应用高效液相色谱与质谱联用技术(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS )定量分析唾液和全血中GSH、GSSG的含量。通过WST法对血浆以及唾液中SOD制率检测分析。结果:健康受试者全血GSH、GSSG的含量分别为1493.41±243.95 μM、0.79±0.34μM、GSH/GSSG 的比值为 2312.90±1130.30。唾液中 GSH-NEM、GSSH 的浓度分别为 2.00±0.80μM, 3.30±0.73μM, GSH-NEM/GSSG 比值为 0.63±0.27。唾液和全血中的GSH-NEM均与年龄呈负相关(r=-0.43, r=-0.49, P<0.05 )。唾液和全血中的GSSG均与年龄呈正相关(r=0.32,r=0.46,p<0.05)。值得注意的是唾液和全血中的GSH-NEM/GSSG的比值与年龄呈显著负相关(r=-0.56, r=-0.53,P<0.05)。同时唾液与全血中GSH-NEM、GSSG和GSH-NEM/GSSG的比值均呈正相关(r=0.28, r=0.28,r=0.28,P<0.05 )。血浆 SOD抑制率为 61.27±5.79%;唾液 SOD抑制率为 43.40±12.99%。血浆中SOD抑制率与年龄呈显著负相关(r=-0.61,P<0.05);唾液中SOD抑制率与年龄呈负相关(r=-0.49,P<0.05);血浆中SOD抑制率与唾液中SOD抑制率与年龄呈正相关(r=0.43,P<0.05),未发现性别差异。结论:当衍生化试剂NEM与沉淀蛋白试剂SSA分别加入时,无需另外调节pH以及温度就能达到较彻底的衍生化反应。研究表明全血及唾液中GSH、GSSG和GSH/GSSG的比值以及唾液和血浆中SOD抑制率均存在增龄性变化,且以上化合物在全血和唾液及血浆和唾液中存在相关性。因此,可通过检测唾液中GSH、SOD初步判断人体的氧化还原状态。